Антинуклеарные антитела положительный субстрат печень позитивный

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

СОЭ используют для наблюдения за активностью заболевания при ревматоидном артрите, гигантоклеточ-ном артериите, ревматической полимиалгии и некоторых других васкулитах.

СОЭ измеряется по высоте (в миллиметрах) столбика, образовавшегося при осаждении эритроцитов в специальной трубке (Westergren или Wmtrobe) за 1 ч.

СОЭ — это непрямой показатель изменений в содержании белков «острой фазы» и концентрации иммуноглобулинов. Белки «острой фазы» представляют собой гетерогенную группу белков (фибриноген, ингибиторы протеаз и пр.), которые

синтезируются в печени в ответ на воспаление. Цитокин воспаления, интерлейкин-6, является наиболее сильным медиатором, стимулирующим выработку в печени белков острой фазы. Любые состояния, сопровождающиеся повышением концентрации белков острой фазы или гипергаммаглобулинемией (поли- или моноклональной), вызывают увеличение СОЭ за счет повышения диэлектрической константы плазмы. В результате происходит уменьшение межэритроцитарных сил отталкивания, что способствует агрегации эритроцитов и ускоряет их оседание. Увеличение СОЭ, не связанное с воспалением, может наблюдаться у пациентов пожилого возраста, женщин и при беременности.

СОЭ определяют по методам Westergren и Wintrobe. Метод Westergren более предпочтителен: используется 200-миллиметровая трубка; предусмотрен этап разведения, что устраняет влияние анемии.

Метод Wintrobe: используется 100-миллиметровая трубка; отсутствует этап разведения. Поскольку в методе Westergren используется более длинная трубка, только он позволяет определить СОЭ 50-60 мм/ч.

Значительно повышенная СОЭ ( 100 мм/ч) бывает при:

Бактериальная инфекция (35 %)

Болезни соединительной ткани: гигантоклеточный артериит, ревматическая полимиалгия, СКВ, прочие васкулиты (25 %)

Опухоли: лимфомы, миеломная болезнь, прочие (15 %)

Значительно пониженная СОЭ (0 мм/ч)

Крайняя степень полицитемии (гематокритное число 65 %)

Повышенная вязкость плазмы

С-реактивный белок

СРБ — это белок, состоящий из пяти идентичных, нековалентно связанных друг с другом субъединиц, расположенных в одной плоскости по принципу кольцевой симметрии. Его функция заключается в связывании с элементами клеточной стенки, Clq-фракцией комплемента и рецепторами на нейтрофилах и моноцитах, что способствует запуску и поддержанию воспалительного ответа. Синтез СРВ как белка «острой фазы» происходит в печени под влиянием интерлейкина-6 и других цитокинов. Повышение его концентрации отмечается в течение первых 4 ч от момента тканевого повреждения и достигает максимума через 24-72 ч. Концентрация СРВ определяется методами ELISA, радиоиммунодиффузии или нефелометрии. В норме этот показатель обычно

Оба теста — СОЭ и СРБ — служат для определения концентрации компонентов «острой фазы» и позволяют количественно оценить генерализованный воспалительный процесс. Величина СОЭ зависит от многих факторов и, следовательно, ее специфичность низка. Тем не менее определение СОЭ — это недорогостоящая и легко выполнимая процедура. Концентрация СРБ отражает содержание конкретного белка «острой фазы», что более специфично. Его концентрация возрастает и снижается быстрее (снижается на 50 % за 24 ч), чем СОЭ, для которой характерны длительно сохраняющиеся высокие показатели (снижается на 50 % за 1 нед) после затухания воспаления. Основным недостатком метода измерения СРБ является его высокая себестоимость по сравнению с таковой для СОЭ.

Антинуклеарные антитела

Исследование на AHA должно выполняться тогда, когда возникает подозрение, что у пациента аутоиммунное заболевание. Исследование на AHA, как правило, не используется в качестве скринингового теста и не входит в комплекс исследований в диагностически неясных случаях.

Основным из используемых в настоящее время методов определения АНА является флюоресцентная микроскопия. Клетки, ставшие после соответствующей обработки проницаемыми, фиксируются к предметному стеклу и инкубируются с сывороткой крови больного, что позволяет AHA связаться с клеточными ядрами. После промывания добавляются вторые антитела, способные к флюоресценции. Они связываются с антителами больного (которые, в свою очередь, связаны с ядрами). Свечение ядер клеток выявляется с помощью флюоресцентного микроскопа. Концентрация AHA в сыворотке крови больного определяется путем разведения последней перед ее добавлением к фиксированным клеткам — чем больше степень разведения (титр), при которой еще отмечается свечение ядер, тем выше концентрация AHA в сыворотке больного.

В качестве субстрата для исследования AHA в большинстве лабораторий используются НЕр-2 клетки (клон пролиферирующих клеток, происходящий из клеточной линии эпителиальной опухоли человека) вместо клеток замороженных срезов внутренних органов грызунов (мышиные печень или почки), поскольку быстро растущие и делящиеся НЕр-2-клетки содержат больший ассортимент ядерных антигенов (таких как SS-A и антигены центромера) в более высокой концентрации. В последнее время были разработаны иммуноферментные методы (ELISA) определения AHA. Они различаются в зависимости от производителя и иногда не позволяют определить некоторые из AHA, выявляемых иммунофлюоресцентным методом. Однако простота выполнения методов ELISA привела к постепенному вытеснению методов флюоресцентного определения AHA.

Предел, за которым тест на AHA становится положительным, был произвольно установлен как уровень антинуклеарных антител, превышающий таковой для 95 % популяции здоровых лиц. В каждой лаборатории определяются свои показатели положительного теста, и они могут сильно различаться по абсолютной величине. В большинстве учреждений граница нормы и патологии соответствует титру 1 /40-1/80 В лабораториях, использующих в качестве субстрата для выявления AHA НЕр-2-клетки, клинически значимый титр обычно 1 : 160.

Положительный тест на AHA еще не является достаточным основанием для постановки нозологического диагноза. В то же самое время низкий титр AHA не позволяет с полной уверенностью исключить аутоиммунное заболевание. Тест на AHA должен использоваться в основном как исследование, подтверждающее обоснованность подозрения врача на наличие СКВ или другого аутоиммунного заболевания.

Результат теста на AHA положительным у здоровых лиц. Тест на AHA считается положительным, когда уровень (титр) AHA превышает таковой для 95 % здоровых лиц Таким образом, до 5 % здоровых людей могут оказаться «АНА-позитивными». У них титр обычно

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Для студента самое главное не сдать экзамен, а вовремя вспомнить про него. 9746 — | 7375 — или читать все.

источник

Антинуклеарные антитела — общее название группы антител направленных против различных компонентов клетки, появление их связано с аутоиммунными заболеваниями, преимущественно системной красной волчанкой.

Синонимы: антиядерные антитела, антинуклеарный фактор, антиядерный фактор, антитела к экстрагируемым ядерным (нуклеарным) антигенам, antinuclear antibodies, Hep-2 substrate, ANA-Hep2, fluorescent antinuclear antibody detection, ANA, FANA

комплекс антител (более 200), преимущественно иммуноглобулины G (реже IgМ и IgА), появляются в результате нарушении механизма аутотолернатности при аутоиммунных и ревматических заболеваниях.

Иммунная система человека производит антитела — белки, которые борются с вирусами, бактериями, грибками, паразитами — т.е. всем, что генетически отличается от «своего». Задание любого антитела — уничтожить инородный материал, а родные клетки не трогать (механизм аутотолерантности)

В некоторых случаях иммунный ответ направлен не против чужих, а против собственных тканей. В таком случае говорят о аутоиммунном заболевании. А антитела, которые вырабатываются к своим же клеткам или их компонентам называются аутоиммунными.

У большинства людей есть в крови незначительное(!) количество аутоантител, которые не являются проявлением болезни.

Только в случае серьезной поломки в иммунитете, уровень аутоантител становится повышенным и достаточным для постановки диагноза.

ANA может быть положительным еще до появления первых симптомов болезни. Около 95 % пациентов с системной красной волчанкой имеют в крови антиядерные антитела. Наличие симптомов волчанки подтверждает диагноз.

  • воздействие ультрафиолетовых лучей на кожу приводит к активации запрограммированной гибели клетки (апоптоза), что является нормальной реакцией организма, но при системных заболеваниях одновременно массово мигрируют лимфоциты
  • ранее недоступные и невидимые для иммунной системы компоненты клетки, такие как ядрышки, гистоны, оболочка ядра и др. «оголяются», а макрофаги, вместо того, чтоб данный материал просто «утилизировать», передают сигнал о нем по цепочке иммунного ответа
  • В-лимфоциты, в ответ на сигнал макрофага, начинают вырабатывают антиядерные антитела, которые связываясь с соответствующим антигеном формируют иммунные комплексы (ядерный антиген + антитело IgG, IgM, IgA)
  • иммунные комплексы оседают на базальной мембране различных органов и тканей, особенно сосудов, активируют систему комплемента — местного воспалительного ответа
  • в итоге — повреждение и нарушение функции органа

Антинуклеарные антитела направлены против различных структур нормальной клетки.

  • anti-Ro (SS-A) — антитела к белкам связанным с РНК Y1-Y5 в сплайсосомах
  • anti-Jo1 — антитела к цитоплазматическому антигену Jo-1
  • anti-dsDNA — антитела к двухцепочечной ДНК
  • anti-Sm
  • anti-La (SS-B) — антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3
  • anti-Sci 70 — антитела к ядерной топоизомеразе
  • anti-U1 RNP — антитела к U1 рибонуклеопротеину
  • антицентромерные антитела
  • антигистоновые антитела

Системная красная волчанка — аутоиммунное заболевание соединительной ткани и сосудов. Это наиболее тяжелое заболевание соединительной ткани, при котором отмечаются резкие боли в суставах, поражение кожи («бабочка»), серозных оболочек, сердца, почек, нервной системы, легких, трофические нарушения.

  • артрит — воспаление сустава, проявляться болью, отечностью, нарушением подвижности, покраснением кожи и повышением температуры над ним
  • воспаление внешней оболочки сердца или плевры (перикардит или плеврит) неясного происхождения
  • изменения в результатах анализа мочи (протеинурия, гематурия — белок или эритроциты в моче)
  • гемолитическая анемия — разрушение эритроцитов с повышением уровня билирубина в крови и моче
  • тромбоцитопения — сниженное число тромбоцитов в крови
  • нейтропения — сниженное число нейтрофилов в лейкоцитарной формуле
  • кожные симптомы — сыпь, утолщение кожи, особенно после активного воздействия солнца
  • синдром Рейно — периодическое изменение цвета пальцев стоп и кистей (бледность, посинение и покраснение) с нарушением чувствительности и болью
  • атипичные неврологические и психические симптомы
  • повышение температуры тела, усталость, снижение веса, увеличение лимфатических узлов

Существует два метода определения антинуклеарных антител в крови.

Непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия (FANA — fluorescent antinuclear antibody test) на препарате Hep-2 клеток (клеточная линия, полученная из аденокарциномы гортани) — антинуклеарные антитела (при их наличии) связываются с антигенами клеток Hep-2, добавляют специальные светящиеся метки, присоединяющиеся к образованному комплексу и под микроскопом смотрят интенсивность и тип свечения. Лучший метод исследования антинуклеарных антител. Другое название — волчаночные тест-полоски.

Результат исследования пишут в виде титра — максимального разведения крови, при котором видно свечение, также описывается тип флуоресценции (в случае положительного результата). Чем больше антител, тем выше титр. Низкие титры считаются негативными, а высокие обозначают повышенную концентрацию антиядерных антител.

  • гомогенный (диффузный, однородный) — при системной красной волчанке, смешанных заболеваниях соединительной ткани (MCTD)
  • зернистый (гранулярный) — при системной красной волчанке, синдроме Шегрена, склеродермии, полимиозите, ревматоидном артрите и MCTD — самый неспецифический
  • ядрышковый (нуклеолярный) — при склеродермии и полимиозите
  • центромерный — при склеродермии и CREST синдроме
  • цитоплазматический — дерматомиозит, полимиозит, аутоиммунные заболевания печени, первичный билиарный цирроз

Пример положительного результата исследования антиядерных антител: «Положительный разведение/титр 1:320, гомогенная картина“.

  • отрицательный результат анализа на антиядерные антитела + симптомы — провести анализы: anti-Ro и anti-Jo1
  • положительный результат анализа на антиядерные антитела + наличие/отсутствие симптомов — провести анализы на anti-DNA, anti-Sm, anti-Ro, антигистоновые и антицентромерные антитела, волчаночный антикоагулянт, anti-Sci-70, anti-U1 RNP, anti-Jo1 — зависит от проявлений заболевания

Ферментный иммунный анализ (ELISA) — антитела, присутствующие в крови, связываются с соответствующим антигеном, что приводит к изменению цвета раствора.

  • менее 1.0 U — отрицательный результат (норма)
  • 1.1-2,9 U — слабо положительный (требует повторения)
  • 3,0-5,9 U — положительный
  • более 6,0 — резко положительный

Положительный результат анализа на антинуклеарные антитела — это не диагноз, а восклицательный знак о необходимости дополнительных исследований. Требует периодического, более тщательного обследования, для максимально раннего выявления возможного заболевания.

Отрицательный результат исследования на антинуклеарные антитела указывает на их отсутствие в крови, но не исключает диагноз аутоиммунного заболевания.

В норме в крови нет антиядерных антител.

  • общий анализ крови
  • общий анализ мочи
  • печеночные пробы — билирубин, АСТ, АЛТ, ГГТ, щелочная фосфатаза
  • ревмопробы — С-реактивный белок, скорость оседания эритроцитов (СОЭ), ревматоидный фактор
  • АЦЦП
  • анализ на LE-клетки
  • циркулирующие иммунные комплексы
  • С3 компонент комплемента
  • С4 компонент комплемента

  • лекарственные препараты — прокаинамид, фенитоин, пенициллин, гидралазин
  • ОРЗ и простуда, любое острое или хроническое инфекционное заболевание

1. Системные заболевания соединительной ткани

2. Аутоимунные заболевания

3. Инфекционные заболевания — частота выявления антинуклеарных антител варьирует

4. Опухолевые заболевания

  • тимома
  • опухолевые заболевания крови — острый и хронический лейкоз, лимфомы

При инфекционных, опухолевых заболеваниях появление антинуклеарных антител неустойчиво — при обострении есть, во время ремиссии исчезают.

источник

Синонимы: АНА, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ, антиядерные антитела, antinuclear antibodies, ANAs, Fluorescent Antinuclear Antibody, Antinuclear factor, ANF

Научный редактор: М. Меркушева, ПСПбГМУ им. акад. Павлова, лечебное дело.

Аутоиммунные заболевания, когда иммунная система атакует собственные ткани организма, считаются одними из самых опасных. Большинство аутоиммунных патологий относятся к хроническим и могут вызывать серьезные нарушения в работе внутренних органов и систем.

Одним из наиболее распространенных тестов, применяемых в диагностике аутоиммунных состояний, является обследование на антинуклеарные антитела (АНА), который проводится тремя способами:

  • методом иммуноферментного анализа ИФА (определяется общий уровень ANA),
  • методом реакции непрямой иммунофлуоресценции РНИФ (выявляется до 15 разновидностей ANA)
  • методом иммуноблоттинга.

Антинуклеарные (антиядерные) антитела представляют собой группу аутоантител, которые, вступая в реакцию с ядрами собственных клеток организма, разрушают их. Поэтому анализ на АНА считается достаточно чувствительным маркером в диагностике именно аутоиммунных нарушений, большая часть из которых сопровождается поражением соединительной ткани. Однако некоторые из видов антинуклеарных антител обнаруживаются и при заболеваниях не иммунной этиологии: воспалительных, инфекционных, злокачественных и пр.

Наиболее специфичны антинуклеарные антитела к следующим заболеваниям:

  • системная красная волчанка (СКВ) – заболевание кожи и соединительной ткани;
  • дерматомиозит – поражение кожи, мышц, скелетной ткани и т.д.;
  • узелковый периартериит – воспаление артериальной сосудистой стенки;
  • склеродермия – уплотнение и затвердение соединительной ткани;
  • ревматоидный артрит – поражение соединительной ткани суставов;
  • болезнь Шегрена – поражение ткани с железистыми проявлениями (снижение секрета слезных и слюнных желез).

Антинуклеарные антитела могут обнаруживаться более чем у 1/3 больных хроническим рецидивирующим гепатитом. Также уровень АНА может возрастать в случае:

  • инфекционного мононуклеоза (вирусное заболевание, сопровождается массовым поражением внутренних органов);
  • лейкоза (злокачественное заболевание крови) в острой и хронической форме;
  • гемолитической анемии (малокровие в результате разрушения эритроцитов);
  • болезни Вальденстрема (поражение костного мозга);
  • цирроза печени (хроническое заболевание, связанное с изменением структуры печеночной ткани);
  • малярии;
  • лепры (инфекционное поражение кожи);
  • хронической почечной недостаточности;
  • тромбоцитопении (снижение выработки тромбоцитов);
  • лимфопролиферативных патологий (опухоли лимфатической системы);
  • миастении (патологическая утомляемость мышц);
  • тимомы (опухоль из вилочковой железы).

Одновременно с определением антинуклеарных антител в процессе иммуноферментного анализа оценивается концентрация иммуноглобулинов: IgA, IgM, IgG. Обнаружение этих компонентов в крови может свидетельствовать о высокой вероятности развития ревматических заболеваний и коллагенозов.

В случае, когда связь между концентрацией антител и симптоматикой у больного не обнаруживается, само присутствие антиядерных антител в крови является диагностическим критерием и может повлиять на выбор лечения. Сохранение высокого уровня антинуклеарных антител при продолжительном курсе терапии свидетельствует о неблагоприятном прогнозе заболевания. Снижение значений АНА на фоне проводимого лечения может указывать на ремиссию (чаще) или приближающийся летальный исход (реже).

Также антинуклеарные антитела могут быть обнаружены у здоровых людей до 65 лет (3-5% случаев), после 65 (до 37%).

Исследовать антинуклеарный фактор целесообразно в следующих случаях:

  • Диагностика аутоиммунных и некоторых других системных заболеваний без ярко выраженной симптоматики;
  • Комплексная диагностика системной красной волчанки, ее формы и стадии, а также выбор тактики лечения и составление прогноза;
  • Диагностика лекарственной волчанки;
  • Профилактическое обследование пациентов с диагнозом красная волчанка;
  • Наличие специфических симптомов: продолжительная лихорадка без установленной причины, боли и ломота в суставах, мышцах, кожные высыпания, повышенная утомляемость и т.д.;
  • Наличие симптомов системных заболеваний: поражение кожи или внутренних органов (почки, сердце), артрит, эпилептические припадки и судороги, лихорадка, беспричинное повышение температуры и т.д.;
  • Назначение лекарственной терапии дизопирамидом, гидралазином, пропафеноном, прокаинамидом, ингибиторами АПФ, бета-блокаторами, пропилтиоурацилом, хлорпромазином, литием, карбамазепином, фенитоином, изониазидом, миноциклином, гидрохлортиазидом, статинами, поскольку есть риск развития лекарственной красной волчанки.

Помимо врача общей практики, направляют на анализ такие узкие специалисты, как

В норме антинуклеарные антител в плазме отсутствуют или определяются в небольшом количестве. Результат зависит от способа выполнения теста:

1. Тест делался методом ИФА

  • менее 0,9 пунктов – отрицательно (норма);
  • от 0,9 до 1,1 пунктов – сомнительно (рекомендуется сделать повторный тест через 7-14 дней);
  • более 1,1 пункта – положительно.

2. Для количественного анализа РНИФ нормой считается титр менее 1:160.
3. Иммуноблоттинг – норма «не обнаружено» (общее заключение / напротив каждого вида антител).

  • нарушение правил подготовки пациентом или алгоритма венепункции медработником;
  • прием лекарственных препаратов (карбамазепин, метилдопа, пеницилламин, токаинид, нифедилин и др.);
  • наличие у пациента уремии (отравление продуктами белкового обмена) может дать ложноотрицательный результат.

Обнаружение антинуклеарных антител может указывать на следующие заболевания:

  • системная красная волчанка;
  • панкреатит (воспаление поджелудочной железы) аутоиммунной природы;
  • сахарный диабет I типа;
  • аутоиммунные поражения щитовидной железы;
  • злокачественные поражения внутренних органов;
  • дерматомиозит;
  • аутоиммунный гепатит;
  • заболевания соединительной ткани;
  • болезнь Шегрена;
  • миастения;
  • склеродермия;
  • ревматоидный артрит;
  • диффузный интерстициальный фиброз (поражение легочной ткани в хронической форме);
  • синдром Рейно (ишемия мелких концевых артерий) и т.д.

Повышение титра АНА при количественном иммуноферментном анализе (РНИФ) говорит о:

  • Системной красной волчанке в активной стадии – титр повышен до 98%;
  • Болезни Крона (гранулематозное поражение пищеварительного тракта) – около 15%;
  • язвенном колите (воспаление слизистой толстой кишки) – от 50 до 80%;
  • склеродермии;
  • болезни Шегрена;
  • Болезни Рейно – до 20%;
  • синдроме Шарпа (смешанное заболевание соединительной ткани);
  • лекарственной волчанке.

Важно! При расшифровке анализа важно понимать, что отрицательный результат не исключает наличия аутоиммунных нарушений у пациентов с характерной симптоматикой. Положительный результат без клинической картины аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом данных других лабораторных анализов.

Биоматериал для проведения ИФА на антинуклеарный фактор – сыворотка венозной крови.

  • Венепункция выполняется в утреннее время и натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти минимум 8 часов). Пить чистую негазированную воду можно;
  • Непосредственно перед забором крови (за 2-3 часа) не рекомендуется курить и пользоваться никотинозаменителями (пластырь, спрей, жевательная резинка);
  • Накануне и в день процедуры нельзя употреблять алкогольные и энергетические напитки, волноваться и заниматься тяжелой физической работой;
  • За 15 дней до теста по согласованию с лечащим врачом отменяется прием лекарственных препаратов (антибиотики, противовирусные, гормоны и др.);
  • Для получения достоверного результата анализ желательно повторить через 2 недели.

Ответ ИФА можно ожидать в течение 1 суток после венепункции, а в экстренных ситуациях, когда обследование проводится по «cito» – около 3 часов.

  • Информация с сайтов лаборатории Инвитро и Хеликс;
  • Данные Национальной медицинской библиотеки США PubMed.

Другие анализы ревматологического скрининга

источник

Антинуклеарные антитела (ANA, АНА) – специфические иммуноглобулины, связывающиеся с компонентами клеточных ядер собственного организма. Определяются в плазме при ревматических болезнях, первичном билиарном циррозе, злокачественных опухолях, инфекциях. Исследование применяется для диагностики и дифференциации аутоиммунных заболеваний в рамках скрининга и при характерных клинических признаках. Забор крови производится из вены. Анализ выполняется тремя способами: иммуноферментным методом (определяется общий уровень ANA), методом иммуноблоттинга и реакции непрямой иммунофлуоресценции (выявляется до 15 разновидностей ANA). В норме результат отрицательный. Срок проведения теста при ИФА – 1 день, при иммуноблоттинге, РНИФ – 8 дней.

Антинуклеарные антитела (ANA, АНА) – специфические иммуноглобулины, связывающиеся с компонентами клеточных ядер собственного организма. Определяются в плазме при ревматических болезнях, первичном билиарном циррозе, злокачественных опухолях, инфекциях. Исследование применяется для диагностики и дифференциации аутоиммунных заболеваний в рамках скрининга и при характерных клинических признаках. Забор крови производится из вены. Анализ выполняется тремя способами: иммуноферментным методом (определяется общий уровень ANA), методом иммуноблоттинга и реакции непрямой иммунофлуоресценции (выявляется до 15 разновидностей ANA). В норме результат отрицательный. Срок проведения теста при ИФА – 1 день, при иммуноблоттинге, РНИФ – 8 дней.

В норме погибшие клетки организма фагоцитируются макрофагами. При аутоиммунном заболевании происходит не только утилизация клеточных компонентов (ядрышек, гистонов, оболочек ядер), но и передача информации о них в рамках иммунного ответа. B-лимфоциты запускают выработку антител к ядерным антигенам. Образующиеся иммунные комплексы закрепляются на базальных мембранах сосудов и органов, активируется система комплемента, развивается местное воспаление. Исследование ANA с помощью иммуноферментного анализа обладает невысокой специфичностью, но экономично по времени и трудовым затратам. Иммуноблоттинг и метод РНИФ дают высокоспецифичную информацию, но их распространение ограничивается трудоемкостью и высокой стоимостью процедуры.

Тест на антинуклеарные антитела назначается при аутоиммунных патологиях. Показания к суммарному определению IgG, IgM, IgA с помощью ИФА:

  • Скрининг коллагенозов. Тест используется для обследования людей из групп риска, при неспецифических и слабовыраженных симптомах: быстрой утомляемости, лихорадке, головных болях. Положительный результат является основанием для выполнения более точных и трудоемких диагностических процедур.
  • Диагностика СКВ. Анализ назначается пациентам с характерными клиническими проявлениями: мышечной и суставной болью, кожными высыпаниями, одышкой, нарушениями сердечного ритма, отеками.
  • Мониторинг СКВ. Определение АТ периодически выполняется для уточнения активности патологии, составления прогноза, оценки эффективности лечения.
  • Диагностика лекарственной волчанки. Тест проводится больным, которые принимают препараты, способные спровоцировать лекарственный волчаночный синдром.

Определение антинуклеарных антител методами иммуноблоттинга и РНИФ используется более узконаправленно. Показания:

  • Дифференциация аутоиммунных заболеваний. Исследование назначается для выявления СКВ, синдрома Шарпа, синдрома Шегрена, склеродермии, полимиозита, дерматомиозита, ревматоидного артрита, первичного билиарного цирроза, первичного склерозирующего холангита. Основанием служат высокие показатели АТ к ядерным антигенам (ИФА), к экстрагируемому ядерному антигену, к ДНК, к нуклеосомам в сочетании с характерной клинической картиной.
  • Мониторинг ревматических болезней. Тест выполняется для выявления обострений, оценки течения и эффективности терапии артритов, остеоартроза, васкулитов, диффузных заболеваний соединительной ткани.

Уровень АНА определяется в венозной крови. Ее забор выполняется утром, специальной подготовки не требуется, но стоит придерживаться общих правил:

  1. Выдержать период голода 4-6 часов. Пить воду разрешено без ограничений.
  2. Ограничить употребление жирной пищи накануне вечером, в течение дня отказаться от приема алкогольных напитков, выполнения интенсивных физических нагрузок. Избегать влияния стрессовых факторов.
  3. За 7-10 дней сообщить врачу об используемых лекарствах. Их действие будет учтено при интерпретации результата.
  4. Физиотерапевтические процедуры, инструментальные обследования выполнять после сдачи крови.
  5. За 30 минут воздержаться от курения, умеренных физических нагрузок.

Кровь забирается из локтевой вены, доставляется в лабораторию в герметичной пробирке. Предварительно из первичного биоматериала выделяют сыворотку. При определении общего количества антинуклеарных антител выполняется иммуноферментный анализ, при исследовании их разновидностей – иммуноблоттинг, реакция непрямой иммунофлуоресценции. В первом случае результат подготавливается за 1 день, во втором – за 8 дней.

В норме АНА в плазме отсутствуют или определяются в небольшом количестве, не влияя на функционирование тканей. Отрицательный результат выражается по-разному в зависимости от способа выполнения теста:

  • ИФА – 0-1,0 Ед, «отрицательно».
  • Иммуноблоттинг – «не обнаружено» (общее заключение / напротив каждого вида АТ).
  • РНИФ – титр менее 1:160.

На итоговый показатель не влияют физиологические факторы. Нормальный результат не исключает заболевание, но снижает вероятность патологии.

Интерпретация повышенного показателя теста зависит от метода исследования. При определении уровня суммарных ANA причиной увеличения их концентрации являются:

  • Аутоиммунные заболевания. Положительный результат выявляет СКВ, ревматоидный артрит, синдром Шегрена, склеродермию, сахарный диабет 1 типа, полимиозит, дерматомиозит, миастению, поражение щитовидной железы, печени.
  • Инфекции. Повышение значения определяется у людей с туберкулезом, вирусным гепатитом, подострым бактериальным эндокардитом, ВИЧ-инфекцией.
  • Онкопатологии. Образование АНА наиболее характерно для рака легких и печени.
  • Прием лекарственных препаратов. Показатель теста растет при использовании ингибиторов АПФ, бета-блокаторов, гидралазина, пропилтиоурацила, хлорпромазина, лития, карбамазепина, фенитоина, изониазида, миноциклина, гидрохлортиазида, ловастатина, симвастатина.

При анализе с определением вида антинуклеарных антител интерпретируется повышение отдельных показателей. При иммуноблоттинге выполняется разделение видов АТ. При РНИФ преобладающие АТ выявляются по характеру свечения. Причинами отклонения результатов от нормы могут быть СКВ, синдром Шарпа, синдром Шегрена, склеродермия, ревматоидный артрит, неонатальный волчаночноподобный синдром, полимиозит, изолированный синдром Рейно, волчаночный нефрит, CREST-синдром, полимиозит, дерматомиозит, лекарственная волчанка, билиарный цирроз.

Анализ на антинуклеарные антитела широко распространен в клинической практике как инструмент для скрининга, дифференциальной диагностики и мониторинга аутоиммунных патологий. Способы выявления АНА адаптируют исследование под разные задачи. За интерпретацией результата и назначением лечения нужно обратиться к врачу – ревматологу, дерматовенерологу, нефрологу.

источник

Антинуклеарные антитела (АНА, антиядерные антитела, антинуклеарный фактор) — показатель системных заболеваний соединительной ткани. Представляет собой группу аутоантител к белкам и другим компонентам, находящимся в ядрах клеток. Основные показания к применению: исключение диагноза — системная красная волчанка (считается , что АНА появляются в 90% случаев СКВ), дифференциальная диагностика системных коллагенозов (системная красная волчанка, склеродермия, узелковый периартериит, дерматомиозит), хронический активный гепатит.

При некоторых заболеваниях, например СКВ, системной склеродермии (системный склероз), некоторых инфекциях, иммунная система пациентов воспринимает ядра (белки ядер) клеток собственных тканей, как чужие, и продуцирует к ним антитела (антинуклеарные антитела — AHA). При этом они повреждают соединительную ткань, что и способствовало внедрению определения антинуклеарного фактора в качестве теста на системные заболевания соединительной ткани.

При интерпретации данных следует учитывать, что спектр AHA включает в себя большую группу аутоантител к ДНК, нуклеопротеидам, гистонам, ядерным рибонуклеопротеидам и другим компонентам ядра. К настоящему времени описано более 200 разновидностей АНА, направленных против нуклеиновых кислот, гистонов, белков ядерной мембраны, компонентов сплайсосомы, рибонуклеоротеинов, белков ядрышек и центромер. Таким образом тест направлен на обнаружение различных антител к компонентам ядра и цитоплазмы, которые впервые были обнаружены при СКВ. В дальнейшем диагностические критерии теста были расширены в связи с обнаружением данных антител и при других заболевания соединительной ткани.

В скрининговых тестах для определения суммарных АНА обычно используется набор следующих антигенов, являющихся основными маркерами аутоиммунных заболеваний соединительной ткани: SS-A (Ro), SS-B (La), Scl-70, Sm, RNP/Sm, J01, центромере B.
Основные антигены, применяющиеся в современных наборах для выявления ядерных антител класса IgG представлены следующим набором:

  1. SS-A (Ro) — ядерные рибонуклеопротеины, (полипептиды). Антитела на них обнаруживаются, чаще, при системной склеродермии (60 % случаев), синдроме Шегрена (до 70% случаев) и при СКВ (до 30% случаев). Считается, что если данные антитела обнаруживаются в крови у беременных, то это является показателем риска увеличения возникновения неонатального волчаночноподобного синдрома у новорожденного ребенка (неонатальный люпус-синдром). Данные антитела матери проходят через плаценту и вызывают поражение плода, приводящие к гемолитической анемии и тромбоцитопении. К тяжелым последствиям относят поражение проводящей системы сердца ребенка (вплоть до постоянной кардиостимуляции). Отмечено, что у женщин у которых во время беременности был выявлен значительный титр данных антител, без явных клинических признаков, в дальнейшем развивается какое либо аутоиммунное заболевание, включая СКВ.
  2. SS-B (La) — ядерные белки. Антитела к ним выявляются до60% случаев при синдроме Шегрена и в 15% случаев при СКВ.
  3. Scl-70 — белок-фермент, участвующий в обмене нуклеиновых кислот (топоизомераза-1). Антитела на данный белок наиболее специфичны при системной склеродермии (до 70% случаев).
  4. Двухцепочечная ДНК — нативная ДНК. Антитела к ДНК наиболее специфичны при СКВ (до 80% случаев) и практически не определяются при ревматоидном артрите и склеродермии.
  5. RNP/Sm — Комплекс антигенов RNP/Sm состоит из U1-рибонуклеопротеидов: U1-68, U1-A, U1-C, U5, U6; а также из Sm-полипептидов: SmA | , SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. Антитела, образующиеся к этим антигенам наиболее специфичны для смешанных заболеваний соединительной ткани — т.е. при наличии симптомов склеродермии, ревматоидного артрита, СКВ, полимиозита (около 95% случаев) и в меньшей степени для СКВ (до 30% случаев).
  6. Jo-1 — фермент — синтетаза аминоацилтранспортной РНК. Аутоантитела к данному белку являются диагностически значимыми при миозите (полимиозит/дерматомиозит).
  7. CENP-B (Центромера) — для выявления Антицетромерных антител (Anti-Centromer B), с целью диагностики CREST-синдрома (данный синдром представляет собой совокупность кальциноза кожи, синдрома Рейно, нарушения моторики пищевода, склеродактилии, телеангиэктазии. CREST-синдром относится к варианту системной склеродермии (системный склероз). Данные антитела у больных свидетельствуют о благоприятном течении системной склеродермии и говорят о небольшом поражении внутренних органов.
  8. Hep-2 клетки — клетки эпителиальной карциномы гортани человека линии Hep-2, содержащие много различных ядерных антигенов, включая антиген SS-A (Ro) и антигены центромеры. Антитела к Hep-2 обнаруживаются у больных с полимиозитом и дерматомиозитом до 90% случаев.
  9. Митохондрии (PDC). PDC — пируватдегидрогеназный комплекс. Большая группа антимитохондриальных антител представляют собой аутоантитела, которые образовались на ферменты пируватдегидрогеназного комплекса, располагающегося в митохондриях клеток и участвующего в окислительном декарбоксилировании пирувата.

Часто эти антитела обнаруживаются при билиарном циррозе печени.

AHA обычно не проникают в живые клетки и поэтому безвредны. Но иногда они образуют комплексы антиген-антитело, которые вызывают повреждение ткани (как, например, при СКВ поражение почек). В связи с вовлечением в патологический процесс многих органов диагностическое значение определения AHA невелико и результаты анализа лишь частично подтверждают клинические данные.

Помимо ревматических заболеваний, АНА обнаруживаются и при хроническом активном гепатите до 50% случаев.

источник

Весь контент iLive проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.

У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.

Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.

У здоровых людей титр антител к нуклеарным антигенам в сыворотке крови 1:40-1:80 (клинически значимый титр — ≥1:160 при использовании метода непрямой иммунофлюоресценции; при использовании скрининговых методов — ниже 1:50).

Антинуклеарный фактор — антитела к цельному ядру. Это гетерогенная группа аутоантител, реагирующих с различными компонентами ядра. Определение антител к нуклеарным антигенам в сыворотке крови — тест на системные заболевания соединительной ткани. Скрининг на наличие антинуклеарных антител в сыворотке крови проводят методом радиоиммунного анализа (РИА), реакции связывания комплемента (РСК) или ИФА.

Положительные результаты скрининга должны быть подтверждены методом непрямой иммунофлюоресценции. В качестве клеточного субстрата используют препараты, приготовленные из суспензии клеток с крупными ядрами [из человеческих клеток линии НЕp-2 (human epithelial cells) — клетки рака гортани, или срезов мышиной печени]. Тип окрашивания (характер распределения флюоресцентной метки в клетках) при разных заболеваниях неодинаков и определяет направление дальнейшего установления специфичности антинуклеарных антител.

  • Диффузное окрашивание (равномерное распределение метки) наименее специфично, возможно при системной красной волчанке, лекарственном волчаночном синдроме и других аутоиммунных заболеваниях, а также у пожилых лиц. При диффузном окрашивании клеток реакцию необходимо повторить с большим разведением исследуемой сыворотки крови. Если тип окрашивания остаётся прежним, наиболее вероятно, что антиген против которого направлены антинуклеарные антитела, дезоксирибонуклеопротеид.
  • Гомогенное или периферическое окрашивание наблюдают, когда в исследуемой сыворотке крови преобладают антитела к двухспиральной ДНК. Этот тип окрашивания наиболее часто обнаруживают при системной красной волчанке.
  • Пятнистое или крапчатое окрашивание обусловлено антителами к экстрагируемым ядерным антигенам и обычно наблюдается при смешанном заболевании соединительной ткани, синдроме Шёгрена, лекарственном волчаночном синдроме.
  • Ядрышковое (нуклеолярное) окрашивание (распределение метки в районе ядрышек) обусловлено антителами к рибонуклеопротеиду (см. ниже). Этот тип окрашивания характерен для системной склеродермии, изредка возможен и при других аутоиммунных заболеваниях.
  • Центромерное или дискретное крапчатое окрашивание обусловлено антителами к центромере (специализированный домен хромосом) и характерно для CREST-синдрома и других аутоиммунных ревматических заболеваний.

Основная цель исследования на антинуклеарные антитела — выявление системной красной волчанки, поскольку при этом заболевании они появляются в сыворотке крови 95% больных в течение 3 мес после его начала.

Определение антител к нуклеарным антигенам имеет большое значение для диагностики коллагенозов. При узелковом полиартериите титр (при использовании скрининговых методов) может увеличиваться до 1:100, при дерматомиозите — до 1:500, при системной красной волчанке — до 1:1000 и выше. При системной красной волчанке тест на выявление антинуклеарного фактора обладает высокой степенью чувствительности (89%), но умеренной специфичностью (78%) по сравнению с тестом на определение антител к нативной ДНК (чувствительность 38%, специфичность 98%). Антитела к нуклеарным антигенам высокоспецифичны для системной красной волчанки. Сохранение высокого уровня антител в течение длительного времени — неблагоприятный признак. Снижение титра предвещает ремиссию или (иногда) летальный исход.

При склеродермии частота выявления антител к нуклеарным антигенам составляет 60-80%, однако титр их ниже, чем при системной красной волчанке. Между титром антинуклеарного фактора в крови и степенью тяжести заболевания взаимосвязь не прослеживается. При ревматоидном артрите часто выделяют СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляют антителак нуклеарным антигенам. При дерматомиозите антитела к ядерным антигенам в крови обнаруживают в 20-60% случаев (титр до 1:500), при узелковом полиартериите — в 17% (1:100), при болезни Шёгрена — в 56% при сочетании с артритом и 88% случаев при синдроме Гужеро-Шёгрена. При дискоидной красной волчанке антинуклеарный фактор выявляют у 50% больных.

Помимо ревматических заболеваний, антитела к ядерным антигенам в крови обнаруживают при хроническом активном гепатите (в 30-50% случаев), причём их титр иногда достигает 1:1000. Аутоантитела к нуклеарным антигенам могут появиться в крови при инфекционном мононуклеозе, острых и хронических лейкозах, приобретённой гемолитической анемии, болезни Вальденстрёма, циррозе печени, билиарном циррозе печени, гепатитах, малярии, лепре, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.

Почти в 10% случаев антинуклеарный фактор обнаруживают у здоровых людей, но в низком титре (не более 1:50).

В последние годы был разработан иммуноферментный метод определения антинуклеарных антител различного спектра, который отличается простотой выполнения и постепенно вытесняет иммунофлюоресцентный метод.

Целый ряд лекарств может приводить к ложноположительному повышению титра антинуклеарных антител: аминосалицилаты, карбамазепин, изониазид, метилдопа, прокаинамид, иодиды, пероральные контрацептивы, тетрациклины, тиазидные диуретики, сульфаниламиды, нифедипин, β-адреноблокаторы, гидралазин, пеницилламин, нитрофурантоин и др., вследствие способности этих препаратов вызывать интерференцию при проведении исследования.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]

источник

  • О нас
    • О компании
    • Администрация
    • Наши представительства
      • Воронеж
        • пр-т Московский, 11
        • пр-т Революции, 1/1
        • пр-т Ленинский, 72
        • пр-т Ленинский, 104/1
        • пр-т Московский, 117 Б
        • ул. Комиссаржевской, 5
        • ул. Минская, 43
        • ул. Писателя Маршака, 4
        • ул. Ростовская, 58/20
        • ул. Кольцовская, 68
      • Борисоглебск
        • ул. Свободы,184
        • ул. Первомайская 88А
      • Бобров
        • ул. К-Маркса, 39
        • ул Парижской Коммуны, 64
      • Лиски
        • ул. Коммунистическая, 62
      • Таловая
        • ул Советская, 169
      • Бутурлиновка
        • ул. Блинова, 52
      • Россошь
        • пр-т Труда, 1Г
      • Липецк
        • ул.Вавилова, 12
        • ул.Ленина, 35
        • пр-т Победы, 106 А
      • Елец
        • ул. Гагарина, 5
      • Данков
        • ул. Строителей, 1
      • Грязи
        • ООО «ДентаВита»
      • Лебедянь
        • ул, Лермонтова 2а
      • Старый Оскол
        • б-р Дружбы, 4
      • Губкин
        • ул.Космонавтов, 10
        • ул.Дзержинского, 17
      • Ростов-на-Дону
        • пер. Днепровский, 122/1
        • ул. Мечникова, 144
        • ул. Миронова, 8
        • ул. 2-я Краснодарская, 147/3
      • Курск
        • ул. Ленина, 84
        • ул. Димитрова, 71
        • пр-т Дружбы, 13
        • ул. Кулакова, 7
        • ул. Ленина, 90/2
        • пр-т Победы, 26
      • Курчатов
        • ул. Энергетиков, 13а
      • Щигры
        • ул.Красная, д. 52
      • Рыльск
        • ул. Розы Люксембург, 76
      • Железногорск
        • ул. Ленина, 28/2
        • Алексеевский проезд, 1
      • Орёл
        • наб. Дубровинского, 96
        • ул. Комсомольская, 126
      • Белгород
        • ул. Преображенская, 89
        • ул. Садовая, 92
      • Ливны
        • ул. Дзержинского, 100
        • ул. М.Горького, д.44
      • Ефремов
        • ул. Мира, 2а
      • Таганрог
        • ул. Греческая, 106
      • Новомосковск
        • ул.Шахтеров, 26
      • Владимир
        • ул. Мира, 9
        • ул Диктора Левитана, 3
        • ул. Добросельская, 124
        • ул. Горького д.117
      • Ковров
        • пр. Ленина д.35
      • Каменск-Шахтинский
        • ул. Степинь, 2 А
      • Суджа
        • ул. Карла Маркса, 1
      • Льгов
        • ул. Красноармейская д.20
      • Шахты
        • улица Шевченко 153 ж
      • пгт Подгоренский
        • ул. Вокзальная, 49
    • Лаборатория
      • Фотогалерея
      • Сертификаты качества
    • Лицензии
      • ООО Медицинский центр «НМТ»
      • ООО МК «Медлайн»
      • ООО Компания «НМТ»
      • ООО ЛДЦ «Эскулап»
      • ООО «Стиль Медика»
      • ООО Хирургический центр «НМТ»
      • ООО ЛДЦ «НМТ»
      • ООО «ЭкспрессАнализ»
      • ООО «АПЕКСМЕД»
      • ООО «Центр Здоровья»
      • ООО «Медлайн»
    • Вакансии
  • Пациентам
    • Новости
    • Статьи
    • Список исследований
    • Дисконтная программа
    • FAQ
    • Врачебный прием
      • Акушер-гинеколог
      • Аллерголог
      • Гастроэнтеролог (диетолог)
      • Гинеколог
      • Гинеколог-маммолог
      • Гинеколог-репродуктолог
      • Гинеколог-эндокринолог
      • Дерматовенеролог
      • Детский гинеколог
      • Иммунолог
      • Кардиолог
      • Косметолог
      • Массаж
      • Невролог
      • Оториноларинголог (ЛОР)
      • Офтальмолог
      • Терапевт
      • Педиатрия
      • Психотерапия
      • Ревматолог
      • УЗИ-специалисты
      • Уролог
      • Эндокринолог
      • Эффективное лечение боли
      • Физиотерапия
      • Центр правильного веса
      • Проктолог
    • Уголок потребителя
      • Специалисты
      • Обязательное уведомление
      • Закон о защите прав
      • Политика обработки ПДн
      • Договор
      • Налоговый вычет за лечение
      • Полис ОМС
      • Федеральная ПГГ
      • Акции
  • Врачам
    • Врачам
    • Статьи
    • Новости медицины
  • Контакты

Получить результаты
Компания «Новые Медицинские Технологии»

Антиядерные (антинуклеарные) антитела, ANA — (от англ. anti-nuclear antibodies; в России широко распространен менее удачный синоним — АНФ, антинуклеарный фактор, который не отражает давно установленную биологическую природу явления) — антитела против основных компонентов ядра клетки (нуклеопротеиды, белки хроматина и др.).
При системных аутоиммунных заболеваниях, а также в процессе развития многих других патологических состояний происходит сенсибилизация лимфоцитов к собственным белкам организма и вырабатываются аутоантитела, направленные против антигенов компонентов клеточных ядер и цитоплазмы. Образующиеся иммунные комплексы аутоантиген-аутоантитело откладываются на базальных мембранах различных тканей и органов (кожа, почки, синовиальные, серозные оболочки, мозг и т. п.), а также снабжающих их кровью сосудов, активируя систему комплемента и вызывая воспаление и повреждение тканей. При этом повышается лизосомальная активность, выделяются медиаторы воспаления. Цитотоксическое действие оказывают фиксируемый иммунными комплексами комплемент и сенсибилизированные лимфоциты. Поражение сосудов на уровне микроциркуляторного русла лежит в основе системного повреждения соединительной ткани и паренхиматозных органов.
Исследование на антиядерные антитела проводят, если возникает подозрение на аутоиммунное заболевание или присоединение аутоиммунного компонента, играющего существенную роль в патогенезе многих нозоформ. Тест на ANA высокочувствителен (до 98%) при системной красной волчанке, однако положительные результаты могут наблюдаться при других коллагенозах и иммунокомплексных заболеваниях, а также при прочих заболеваниях, протекающих с развитием аутоиммунного компонента.
Результаты теста, полученные в разных лабораториях, могут отличаться вследствие особенностей использующихся методов. Поэтому полноценный лабораторный ответ при исследовании антинуклеарных антител обязательно должен включать описание использованного метода. Очень обширный перечень антигенов, объединенных в понятие «ядерные», требует также обязательного уточнения, антитела к каким из них могут быть выявлены используемым методом, а к каким — не могут. Иммунофлюоресцентные методы, в которых в качестве субстрата используются животные клетки, позволяют, помимо антиядерных антител, выявлять и дифференцировать также антитела к некоторым компонентам цитоплазмы, что расширяет их возможности.

Показания к назначению анализа: диагностика и дифференциальная диагностика системных заболеваний соединительной ткани (особенно СКВ), аутоиммунного гепатита, вирусного гепатита с аутоиммунным компонентом (индуцированным вирусами или лечебными вмешательствами), первичного билиарного цирроза, рассеянного склероза; выявление аутоиммунного компонента при различных заболеваниях, в патогенезе которых может играть роль аутоагрессия. Материал для исследования: сыворотка крови.

Для определения антинуклеарных антител используется методика непрямой иммунофлюоресценции с использованием в качестве субстрата клеток культивируемой линии Нер-2.

Образец (исследуемая сыворотка крови) инкубируется с субстратом, если в сыворотке присутствуют аутоантитела к ядерным или цитоплазматическим антигенам, они связываются с соответствующими компонентами субстрата с образованием комплекса антиген-антитело, который выявляется конъюгатом — антителами против иммуноглобулинов человека, меченными ФИТЦ. В результате при изучении с помощью люминесцентного микроскопа выявляется специфическая флюоресценция соответствующих ядерных или цитоплазматических структур клеток.

Использование в качестве субстрата клеток злокачественной культивируемой линии благодаря их особенностям (высокое ядерно-цитоплазматическое соотношение, крупные размеры, наличие большого количества митозов) позволяет оценить различные типы свечения, характерные для присутствия в образце крови широкого спектра антител к различным антигенам, имеющих различные клинические ассоциации.
Следует иметь в виду, что часть из определяемых типов свечения является высокоспецифичной, четко ассоциирована с определенными заболеваниями и имеет вполне определенную диагностическую значимость, в особенности при выявлении в высоких титрах; однако некоторые антитела к различным антигенам могут давать сходные типы свечения, в таких случаях может требоваться дальнейшее обследование для уточнения конкретного антигена, к которому направлены аутоантитела. С другой стороны, определенный тип антител может встречаться при нескольких нозологических формах. Существуют также антитела (они встречаются редко), реагирующие исключительно с компонентами веретенного аппарата клеток; обычно они не связаны с аутоиммунными заболеваниями, и их обнаружение расценивается как ложнопозитивный, не имеющий клинических ассоциаций результат.

Все вышеперечисленные особенности обязательно отражаются в лабораторном заключении, где, помимо указания типа свечения и соответствующего ему наиболее вероятного типа антител, даются также рекомендации по трактовке результатов в смысле возможной ассоциации с конкретными нозоформами или синдромами, а также необходимые дополнительные лабораторные исследования.

Достоинством метода иммунофлюоресценции с использованием клеток злокачественных культивируемых линий является также возможность выявления антител к некоторым антигенам цитоплазматической локализации: митохондриям, актину, лизосомам и др.
Некоторые из выявляемых антиядерных и антицитоплазматических антител с характерными для них видами свечения и клиническими ассоциациями приведены ниже:

  • ядерный гомогенный тип — антитела (АТ) к ДНК (двух- и односпиральной), антитела к ДНП (дезоксинуклеопротеид — комплекс ДНК с гистонами), антитела к гистонам, антитела к другим компонентам хроматина (протамины и т.д.); клинические ассоциации — СКВ (анти-ДНК, антитела к гистонам — в высоких титрах); лекарственная волчанка, ревматоидный артрит (антитела к гистонам);
  • ядерный периферический тип — АТ к двухспиральной ДНК, гистонам; клинические ассоциации — СКВ, лекарственная волчанка);
  • ядерно-мембранный ламиновый тип — АТ к ламинам (фибриллярным белкам мембраны ядра); клинические ассоциации — СКВ, линейная склеродермия, ревматоидный артрит, сочетанный синдром гепатит/тромбопения/анемия;
  • ядерно-мембранный кольцеобразный тип с крапчатым свечением цитоплазмы — антимитохондриальные антитела к компонентам митохондрий М2 (пируватдегидрогеназный комплекс), М3, М6; клинические ассоциации см. митохондриальный тип;
  • ядерные каналы — АТ к белкам комплекса канальцев ядерной мембраны; клинические ассоциации — полимиозит;
  • перихроминовый тип — АТ к перихромину; клинические ассоциации — СКВ;
  • гетерогенный ядерный РНП (рибонуклеопротеин) — АТ к различным компонентам матрикса ядра; клинические ассоциации — смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ);
  • Sm/РНП — АТ к ядерному РНП или Sm-комплексу; клинические ассоциации — СКВ, СЗСТ (антитела к Sm); синдром Шегрена, склеродермия, ревматоидный артрит, СКВ, дискоидная волчанка, вызванная прокаинамидом (антитела к РНП);
  • центромерный тип — АТ к центромере (кинетохору); клинические ассоциации — синдром CREST (кальциноз, феномен Рейно, дисфункция пищевода, склеродактилия, телеангиэктазия), склеродермия, первичный билиарный цирроз
  • ядерный крапчатый тип (NSP1) — АТ против слабо охарактеризованных белков, часто сочетающиеся с антителами к актину или митохондриям; клинические ассоциации — первичный билиарный цирроз (NSP1 + митохондриальный тип), хронический активный гепатит (NSP1 + актин);
  • ядрышковый гомогенный тип — АТ к нуклеолину и другим компонентам ядрышек; клинические ассоциации — сочетанный синдром полимиозита/склеродермии, склеродермия в основном с поражением почек;
  • ядрышково-кластерный тип — АТ к фибриллярину (7-2-РНК), антитела к рибонуклеопротеину U3РНП; клинические ассоциации — склеродермия, обнаруживаемая в основном у молодых мужчин;
  • ядрышково-крапчатый тип — АТ к Scl-70 (АТ к топоизомеразе 1); клинические ассоциации — склеродермия;
  • митохондриальный (цитоплазматический) тип — АТ к М2 (пируватдегидрогеназный комплекс), М3, М6 компонентам митохондрий (антитела к М1 и М5 на клетках Hep-2 не выявляются); клинические ассоциации — первичный билиарный цирроз, лекарственная СКВ (антитела к М3, М6), хронический активный гепатит, синдром Рейнольдса, синдром Шегрена, ревматоидный артрит;
  • мелкокрапчатый (цитоплазматический) тип — АТ к различным цитоплазматическим белкам, например, SPR (signal recognition particle — частица, распознающая сигнал); клинические ассоциации — миозит;
  • перинуклеарный тип — АТ к антигенам Jo-7, PL1, PL7, PL12; клинические ассоциации — полимиозит, в основном в сочетании с соединительнотканным заболеванием легких; дерматомиозит;
  • рибосомальный тип — АТ к антигенам рибосом; клинические ассоциации — СКВ, в основном с неврологической симптоматикой, ревматоидный артрит, синдром Шарпа;
  • актин — АТ к актину (антитела к гладкой мускулатуре); клинические ассоциации — хронический активный гепатит, первичный билиарный цирроз;
  • тубулин — АТ к тубулину; клинические ассоциации — алкогольный цирроз, тиреоидит Хашимото, склеродермия, синдром CREST, феномен Рейно;
  • цитокератин — АТ к цитокератину; клинические ассоциации — ревматоидный артрит, склеродермия, СКВ.

У здоровых лиц моложе 60 лет следует ожидать отрицательных результатов на антитела к компонентам ядра и цитоплазмы; в низком титре (слабоположительный результат) эти антитела все же обнаруживаются у 2-3% (по некоторым данным, до 10%) практически здоровых людей, однако никогда нельзя предсказать, не разовьется ли у этих людей аутоиммунное заболевание в будущем (так, по данным некоторых авторов, антитела к ДНК начинают выявляться задолго до начала клинических проявлений СКВ, латентный период может продолжаться годами). После 60 лет частота слабоположительных результатов с возрастом постоянно растет. Клиническая значимость этих результатов остается неясной; как правило, они выявляются только в первичном (скрининговом) разведении 1:40. Исходя из этого, при выявлении положительного результата в скрининговом титре 1:40 всегда необходимо титрование, как минимум до диагностического титра 1:80. В любом случае представляется целесообразным последующее регулярное клинико-лабо­ра­торное наблюдение лиц, у которых выявлены ANA в низком титре.

ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА Положительный результат предполагает наличие определенных заболеваний (см. ниже), однако, как и результат любых лабораторных исследований, может нуждаться в подтверждении или уточнении с помощью других методов, а также в установлении клинико-лабораторных корреляций.
Надо иметь в виду, что различные лекарственные препараты могут вызывать образование аутоантител (гидралазин, прокаинамид, фенитоин, карбамазепин, изониазид, хлорпромазин, пеницилламин, леводофа, пенициллин, фенилбутазон, пероральные контрацептивы, хинидин). Наиболее частыми мишенями для этих ятрогенных аутоантител являются ядерные гистоны, что приводит к развитию гомогенного или гомогенного периферического типа свечения.

— системная красная волчанка (СКВ),
— ревматоидный артрит,
— синдром Шегрена,
— склеродермия,
— дерматомиозит,
— узелковый периартериит и др.;

  • Инфекции (туберкулез, инфекционный мононуклеоз, острый и особенно хронический вирусный гепатит, подострый инфекционный эндокардит, ВИЧ-инфекция и др.);
  • Хронический аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз печени;
  • Сахарный диабет (инсулинзависимый);
  • Множественный склероз;
  • Легочной фиброз;
  • Системные васкулиты.

Антинуклеарные антитела также могут выявляться при острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, малярии, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.

Титры антинуклеарных антител при узелковом периартериите могут достигать 1:100, при дерматомиозите — 1:500, СКВ — 1:1000 и выше. При СКВ тест на выявление антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции обладает высокой степенью чувствительности (до 98% по данным разных авторов), но умеренной специфичностью (78%), так как антинуклеарные антитела могут встречаться и при других, указанных выше, заболеваниях. Для сравнения, тест определения антител к нативной ДНК с помощью ИФА в диагностике СКВ обладает значительно меньшей чувствительностью — 38% (т.к. патогенетическую роль в развитии СКВ могут играть не только антитела к ДНК, но и антитела к гистонам, дезоксирибонуклеопротеину и многим другим ядерным антигенам); однако специфичность определения антител к нативной ДНК для диагноза СКВ является почти абсолютной (98%). Клиническая интерпретация этих различий в чувствительности и специфичности разных лабораторных тестов в диагностике СКВ выглядит следующим образом: отрицательный результат обнаружения антител к нативной ДНК с помощью ИФА не исключает диагноз СКВ, обнаружение же этих антител практически со 100% вероятностью подтверждает диагноз. Другая ситуация имеется в отношении АНФ: отрицательный (особенно многократный) результат обнаружения антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции делает диагноз СКВ (во всяком случае, активной формы) весьма сомнительным (т.к. метод обнаруживает практически все аутоантитела, встречающиеся при СКВ), обнаружение же антинуклеарных антител не всегда будет достаточным основанием для постановки диагноза СКВ, оно подтверждает наличие феномена аутоиммунитета и обычно требует для установления окончательного диагноза дальнейшей клинико-лабораторной дифференциации с учетом типа свечения, титра антител, проведения дополнительных уточняющих или подтверждающих тестов, рекомендованных лабораторией, сопоставления результатов с клинической картиной.
При СКВ корреляция между величиной титра ANA и клиническим состоянием обычно отсутствует, хотя сохранение высоких титров в течение длительного времени является неблагоприятным прогностическим признаком. Снижение уровня антител предвещает ремиссию, но иногда — летальный исход (феномен потребления антител: при нарастающем аутоиммунном повреждении тканей темп высвобождения ядерных антигенов, с которыми связываются наработанные антиядерные антитела, превышает скорость синтеза новых аутоантител).
При склеродермии частота выявления антител к ядерным антигенам составляет 60-80%, их титр обычно ниже, чем при СКВ. При ревматоидном артрите часто встречаются СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляются ANA. При дерматомиозите антитела к ядерным антигенам в крови встречаются в 20-60% случаев, при узелковом периартериите — в 17% (титр до 1:100), при болезни Шегрена — в 56% в сочетании с артритом и в 88% случаев — при комбинации с синдромом Гужеро-Шегрена. При дискоидной (кожной) красной волчанке антинуклеарный фактор выявляется у 50% больных.
Частота обнаружения антинуклеарных антител при ревматических
заболеваниях и у здоровых лиц (Насонова В.А. и др., 1997)

источник

© 2024 Печень и почки