Лейкоз птиц (Leucosis avium), лейкемия, белокровие, гемабластоз. — вирусное заболевание опухолевой природы, сопровождающееся прогрессирующим патологическим разрастанием кроветворной ткани, как в органах кроветворения, так и за их пределами.
Историческая справка. Впервые у кур лейкемические изменения описал итальянский ученый В.Канарини в 1896году. В дальнейшем изучением лейкоза птиц в 1908 году занимались датские ученые В. Эллерман и О. Банг . Они экспериментально установили перевиваемость миелоидной и эритроидной лейкемии от больных кур здоровых кровью, тканевой эмульсией и бесклеточными фильтратами. В 1921 году В. Эллерман заменил название болезни лейкемия термином «лейкоз», описал у кур 3 формы лейкоза птиц; алейкемический экстраваскулярный лимфоидный лейкоз, лейкемический и алейкемический миелоидный лейкоз и эритроидный (интраваскулярный лимфоидный) лейкоз. В конце 30-х годов была экспериметально установлена взаимосвязь лейкоза с опухолями различного вида.
Дальнейшие исследования показали, что вирусные штаммы обладают свойством индуцировать не только исходное заболевание, но также вызывать различные саркомы, остеопетроз и нейролимфоматоз. В результате исследователи стали полагать, что данные заболевания имеют одну этиологию.
Исходя из вышеизложенного в 1941 году американские исследователи объединили лейкоз, миелоцитому, фибросаркому, эндотелиому, остеопетроз и нейролимфоматоз в «лейкозный комплекс птиц». Ими также был введен термин «лимфоматоз» для обозначения поражений, которые проявляются размножением опухолевых лимфоидных клеток, независимо от того, образуют ли они опухолевые узлы или очагово – диффузно рассеяны по тканям различных органов.
На сегодняшний день остановлена следующая классификация лейкоза птиц:
- лимфоидный лейкоз;
- мелоидный лейкоз (миелобластоз);
- эритроидный лекоз(эритробластоз).
Распространение лейкоза птиц встречается обычно в странах с развитым промышленным птицеводством.
Лейкоз птиц наносит птицеводческим хозяйствам значительный экономический ущерб, который складывается от потерь от падежа птицы, снижения яйценоскости, санитарной браковки пораженных тушек, а также затратами на проведение мер борьбы с болезнью.
В России впервые случай лейкоза птиц описал Н.А. Сошественский в 1908году. В 30-х годах лейкоз птиц стали диагносцировать во многих регионах страны. При этом потери кур от лейкоза в отдельных птицеводческих хозяйствах колеблется от десятых долей процента до 7-12%, а иногда и до 30 и более процентов к числу вскрытых трупов. Наибольшее распространение имеет лимфоидный лейкоз (лимфоматоз).
Этиология. Лейкоз у птиц вызывается фильтрующим вирусом. Выделено большое число вирусных штаммов перевиваемых форм лейкоза птиц. Эти вирусы подразделены на 3 подгруппы: А, В и С. К подгруппе А относятся вирусные штаммы RAV -1, RAV -3, RAV-4, RAV -5, FAV -1, FMV -1, RIF-1, RPL-12, SR-RSV -1, MN-RSV -2, NA-RSV; к подгруппе В –RAV-2, AMV-2, RIF-2, SR-RSV -2, NA-RSV; к подгруппе С –CL-RSV, PR-RSV.
У больных птиц вирус обнаружен в крови, в экстрактах из органов и в испражнениях. Внешне здоровые куры также могут содержать его в латентном состоянии и передавать своему потомству.
Вирусы лейкоза быстро утрачивают свою активность при высоких температурах, при 46°С и выше. При нагревании до 70°С вирус лейкоза инактивируется за 30минут, при 85°С –за 10секунд.
Эпизоотология. Лейкозом птиц болеют преимущественно куры, реже индейки, цесарки, утки и гуси. Описаны случаи заболевания лейкозом у фазанов, попугаев и страусов. Источником инфекции являются клинически больные и внешне здоровые куры – вирусоносители. Передача инфекции происходит преимущественно через яйца, реже аэрогенным и алиментарным путями. Наибольше всего восприимчивы к вирусу лейкоза цыплята, в первые 40 дней их жизни, а первые клинические признаки отмечаем у кур преимущественно старше 4 месяцев. Из организма птицы вирус выделяется со слюной, экскрементами и с яйцом.
К возникновению лейкоза у птиц предрасполагает – недостаток в кормах правильно сбалансированного белково-витаминного и минерального комплекса веществ, а также нарушения зоогигиенических параметров микроклимата в помещение птичника, скученное содержание.
Патогенез. Для лейкоза характерно прогрессирующее разрастание кроветворной ткани в кроветворных органах и за их пределами. Источником патологического кроветворения у птиц являются малодифференцированные элементы соединительной ткани. В результате избыточной пролиферации и метаплазии этих клеток в органах образуются лейкемические тканевые разрастания в виде инфильтратов, очагов и узлов, в результате чего происходит увеличение пораженного органа в объеме. В кровеносные сосуды в большом количестве поступают незрелые формы лейкоцитов и эритроцитов (лейкемический лейкоз). У отдельной птицы кровь может быть в пределах нормы (алейкемический лейкоз).
По виду размножающихся в органах клеток принято выделять следующие формы лейкоза: ретикулез, гемоцитобластозный, эритроидный, миелоидный, лимфоидный лейкозы и другие. Развитие у птицы той или иной формы лейкоза зависит от типа реакции организма птиц. На характер реактивности хозяина влияют также генетические факторы, возраст цыплят в момент их заражения, способ инфицирования и доза поступившего в организм птицы вируса.
Важным фактором, оказывающим существенное влияние на реакцию хозяина, является возраст птицы в момент контакта с вирусом. Установлено, что цыплята в 3-дневном возрасте примерно в 50раз более восприимчивы к вирусу BAI – А, чем птицы в возрасте 21 дня. На возникновение лейкоза оказывает влияние и способ заражения. Эритробластоз и миелобластоз чаще возникает у цыплят при внутривенном и костномозговом способе заражения. Лимфоидная ткань считается наиболее чувствительной к воздействию вируса; этим объясняется преобладание в естественных условиях лимфоидной формы лейкоза птиц.
Иммунитет. Экспериментально доказано, что при лейкозе птиц образуется 2 вида иммунитета – иммунитет к заражению вирусом и иммунитет к прививке лейкозной ткани. В лейкозных клетках выявлены специфические антигены вирусного и тканевого происхождения. В плазме крови кур обнаружены антитела, нейтрализующие вирус. Несмотря на выявление вируснейтрализуищих антител в крови кур, все попытки искусственной иммунизации против лейкоза кур пока безуспешны.
Клиническая картина. Лейкоз у птиц протекает хронически. Различают 2 стадии лейкоза птиц: длительную субклиническую и кратковременную клиническую, которая у птиц заканчивается смертью. Клинические признаки при лейкозе птиц не характерные. Инкубационный период длится от 2-9 дней до нескольких месяцев. В выраженных случаях проявления болезни у больной птицы регистрируем истощение, вялость, сонливость, понос. Гребень бледный с желтушным оттенком или цианотичный. Брюшная область у птицы нередко увеличена, проведенной пальпацией ветеринарный специалист может установить увеличенные органы и плотные узлы новообразований, печень выступает за края ребер и грудной кости. При поражении кишечника и брыжейки ветеринарный врач иногда отмечает водянку грудобрюшной полости; больные куры принимают позу пингвина.
При исследование проб крови, не всегда картина крови бывает характерной для лейкоза птиц. При лейкемическом лимфоидном лейкозе птиц иногда отмечаем увеличение количества лимфобластов; лимфоцитов и псевдоэозинофилов свыше 100 000. При исследование костного мозга, в нем преобладают лимфобласты, пролимфобласты и лимфоциты. При лейкемической и ретикуло-эндотелиальной формах лейкоза птиц, в крови и костномозговом пунктате, увеличено количество моноцитарных и псевдоэозинофильных лейкоцитов на различной стадии их дифференцировки.
Эритробластоз, гемоцитобластоз и миелобластоз проявляется бластозными кризисами и спонтанными ремиссиями (В.М.Калуйна, 1967). При эритробластозе специфично увеличение числа эритробластов в периферической крови и костном мозге (до 90%), количество эритроцитов снижается до 0,5 миллионов, гемоглобина на 1,5 г/%, уменьшено содержание тромбоцитов. Для гемоцитобластоза свойственно избыточное размножение гемоцитобластов. При лейкемическом миелоидном лейкозе птиц в циркулирующей крови и костном мозге увеличено содержание миелобластов, промиелоцитов, метамиеелоцитов и миелоцитов. Болезнь продолжается от нескольких суток до года, что зависит от формы проявления лейкоза птиц.
Исход болезни, как правило, смертельный.
Патологоанатомические изменения. При лимфоидном лейкозе типичные для этой формы лейкоза изменения обнаруживают в печени, селезенке, почках, реже в других органах и коже. Различают диффузное и узелковое поражение паренхиматозных органов. Обе формы заболевания у птицы протекают как системное заболевание. При системном (генерализованном) лимфоидном лейкозе, печень бывает увеличена в несколько раз и нередко занимает всю грудобрюшную полость. Доли пораженной печени увеличены неравномерно. В зависимости от кровенаполнения и развития дистрофических и пролиферативных процессов в печени ее цвет бывает серо-красным или желто-серый. Консистенция печени плотная, или дряблая, легко рвется при надавливании, под капсулой регистрируем кровоизлияния.
При диффузном поражении поверхность печени гладкая. С многочисленными точечными или более крупными серовато-белыми очажками; при узелковом поражении – на поверхности выступают саркоподобные узлы различной величины различной величины. В том и другом случае поражения проникают глубоко в паренхиму органа.
Селезенка нормальная или несколько увеличена, синюшно-красного цвета, иногда серовато-красного, с многочисленными очажками и узелками серовато-белого цвета. Почки в результате образования на них узелков различной формы имеют красно-серый цвет. Узелковые поражения лейкозного характера могут быть и в других органах.
Миелоидный лейкоз у птиц встречается относительно редко и сопровождается преимущественным поражением печени, селезенки, почек и яичника. Если течение лейкоза острое, то изменений в указанных органах ветспециалисты не регистрируют. При хроническом течении болезни отмечаем анемию со слабо выраженной желтушностью видимых слизистых оболочек. Печень увеличена в размере, красновато-коричневого цвета, с многочисленными точечными беловатыми очажками или же выявляются более крупные узлы беловато-серой ткани, консистенция дряблая, ткань легко рвется при надавливании. Селезенка увеличена, синюшно-красного цвета. В почках находим узлы различной величины. Костный мозг водянистый, светло-красного цвета, с мелкими кровоизлияниями. Из других изменений обнаруживают асцит, гидроперикардит, анасарку (отек подкожной клетчатки), кровоизлияния в разных органах. У отдельной больной птицы отмечаем разрывы печени и яичника с полостными кровоизлияниями.
Ретикулоэндотелиальный лейкоз у больной лейкозом птицы сопровождается гиперпластическими процессами в строме паренхиматозных органов. Данный вид лейкоза при вскрытии чаще регистрируется у молодых кур и индеек. Доминирующими клеточными элементами являются гистиоциты. Вскрывая данных кур, ветеринарный врач находит синюшность кожных придатков головы, нередко истощение, иногда водянку грудобрюшной полости. Печень увеличена в объеме серовато-красная или вишнево – красного цвета, с точечными серовато-белыми очажками, которые могут быть в виде узелков. Консистенция печени плотная, ее ткань легко рвется (даже ломается) У отдельной птицы при вскрытии встречаем прижизненные разрывы печени с последующим кровоизлиянием в грудобрюшную полость. Селезенка серовато-красного цвета, с беловато серыми очажками. Костный мозг темно красного цвета.
Эритроидный лейкоз встречается у птицы довольно редко. Патологоанатомическая картина при этой форме лейкоза выражена слабо. Видимые слизистые оболочки анемичны и желтушны. Под кожей и во внутренних органах встречаются кровоизлияния. Паренхиматозные органы увеличены, с мелкоточечными светло-серыми очажками. У отдельной птицы отмечаем асцит. Костный мозг разжижен.
Диагноз на лейкоз ставится комплексно, используя вирусологические, эпизоотологические, клинические и патологоанатомические методы. Решающим в постановке диагноза является патологоанатомическое вскрытие. Для определения формы лейкоза применяется гистологический метод. Разработаны серологические реакции для выявления группоспецифического антигена вирусов лейкозно –саркомной группы: РСК, КоФАЛ – тест, реакция иммунофлуоресцен – ЦШП, РНГА с препаратом для диагностики лейкоза птиц (ПДЛП), предложенным П.Зеленским. Для выявления типоспецифических антигенов и антител используют РИФ-тест и реакцию централизации.
Дифференциальный диагноз. Лейкозы у птиц (гемобластозы) необходимо дифференцировать от болезни Марека, туберкулеза, пуллороза –тифа, колигрануломатоза, гепатитов, мочекислого диатеза, сарком, карцином.
При болезни Марека у павшей птицы находим сходные с лейкозом образования в паренхиматозных органах. Болезнь Марека возникает внезапно и поражает молодняк в возрасте 1-5 месяцев. В патологический процесс нередко вовлекаются легкие, яичник, железистый желудок и кожа.
При туберкулезе чаще поражается печень, селезенка, костный мозг и кишечник. Туберкулезные узлы у павшей птицы, обладают способностью сливаться в более крупные (когломераты), и часто окрашены в серо-желтый цвет, центр у таких узлов обычно подвергается расплавлению. При лейкозе эти поражения имеют саловидного цвета и консистенции.
При колигрануломатозе типичные изменения обнаруживают в печени и в местах ответвления слепых кишок. Цвет этих образований желтый, вид зернистый, на разрезе нередко отмечаем слоистость; гранулы, сливаясь, нередко образуют конгломерирующие формы плотной консистенции.
Профилактика и меры борьбы. Эффективных мер борьбы с лейкозом птиц нет. Для предупреждения заноса инфекции в хозяйство необходимо закупать яйца и цыплят для племенных целей только в хозяйствах. Благополучных по лейкозу птиц. Необходимо строго соблюдать изолированное содержание цыплят по возрастным группам, особенно в течение первых четырех недель Ветспециалисты должны регулярно осматривать птицепоголовье и своевременно выделять кур, подозрительных по заболеванию лейкозом птиц. Создают наилучшие условия содержания и кормления птиц. Систематически проводят ветеринарно-санитарные мероприятия (регулярная очистка и дезинфекция инвентаря, помещений и выгулов для птиц и т.п.). Селекционным методом стремятся получить линии кур, устойчивых к лейкозу птиц. Неблагополучные по лейкозу птиц птицеводческие хозяйства трудно оздоровить одной выбраковкой цыплят и кур, подозрительных по заболеванию лейкозом. Только замена всего птице поголовья новыми семействами или линиями кур из благополучных по лейкозу птиц хозяйств может дать желаемый результат.
При отсутствии анемии или желтухи и изменений в мускулатуре печень, селезенку и другие пораженные органы больной птицы утилизируют, а тушку обезвреживают провариванием. Тушки кур с измененной мускулатурой направляют на техническую утилизацию.
источник
Синдром большой печени и селезенки — новая вирусная болезнь кур в России Текст научной статьи по специальности « Медицина и здравоохранение»
Впервые в России с помощью OT-ПЦР (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией) идентифицирован возбудитель синдрома большой печени и селезенки — заболевания кур родительского стада бройлеров. На птицефабрике у пораженной птицы отмечали снижение яйценоскости и повышенный отход, при вскрытии наблюдали кровянистую жидкость в брюшной полости, гепатои спленомегалию , подкапсульные гематомы печени, печень имела ломкую консистенцию. Вирусы, вызывающие сходные клинические признаки (аденовирус, вирус болезни Марека и вирус лейкоза), обнаружены не были. Секвенирование фрагмента гена капсидного белка ORF2 выявленного нами вируса и последующее сравнение с аналогичными последовательностями из базы данных GenBank (NCBI) подтвердили идентичность агента вирусу гепатита Е. Результаты секвенирования ампликона продемонстрировали 61,6-78,6 % гомологии с последовательностями из GenBank для гена капсидного белка ORF2 вируса гепатита Е.
HEPATITIS SPLENOMEGALY SYNDROME, A NEWLY >For the first time in Russia, the viral agent of hepatitis splenomegaly syndrome, a disease of laying hens from broilers’ parental flock, has been identified by the use of RT-PCR (reverse transcription — polymerase chain reaction). On a poultry farm a low laying ability and high death of sick birds were examined, and the dissection revealed the bloody liquid in abdominal cavity, the hepatoand splenomegaly, the hepatic subcapsular hematomas and a breakable consistence of the liver. The viruses that cause similar clinical symptoms (adenovirus, Marek’s disease virus, leucosis virus) were not found. The sequence analysis of DNA fragment of ORF2 capsid protein gene of isolated virus and subsequent comparison with analogous sequences from GenBank database (NCBI) confirmed the identity of the agent to hepatitis E virus. Amplicon sequencing showed 61.6-78.6 % homology to the sequences from GenBank for capsid protein ORF2 gene of hepatitis E virus.
Текст научной работы на тему «Синдром большой печени и селезенки — новая вирусная болезнь кур в России»
СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ БИОЛОГИЯ, 2012, № 4
СИНДРОМ БОЛЬШОЙ ПЕЧЕНИ И СЕЛЕЗЕНКИ — НОВАЯ ВИРУСНАЯ БОЛЕЗНЬ КУР В РОССИИ
Впервые в России с помощью OT-ПЦР (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией) идентифицирован возбудитель синдрома большой печени и селезенки — заболевания кур родительского стада бройлеров. На птицефабрике у пораженной птицы отмечали снижение яйценоскости и повышенный отход, при вскрытии наблюдали кровянистую жидкость в брюшной полости, гепато- и спленомегалию, подкапсульные гематомы печени, печень имела ломкую консистенцию. Вирусы, вызывающие сходные клинические признаки (аденовирус, вирус болезни Марека и вирус лейкоза), обнаружены не были. Секвенирование фрагмента гена капсид-ного белка ORF2 выявленного нами вируса и последующее сравнение с аналогичными последовательностями из базы данных GenBank (NCBI) подтвердили идентичность агента вирусу гепатита Е. Результаты секвенирования ампликона продемонстрировали 61,6-78,6 % гомологии с последовательностями из GenBank для гена капсидного белка ORF2 вируса гепатита Е.
Ключевые слова: вирусный гепатит Е кур, гепато- и спленомегалия, генетическая идентификация.
Keywords: avian hepatitis E virus, hens, hepato- and splenomegaly, genetic identification.
Вирусный гепатит Е кур (avian hepatitis E virus, aHEV) — относительно новое заболевание кур, которое может проявляться в виде двух форм: как болезнь большой печени и селезенки (big liver and spleen disease, BLS) (1) или как синдром гепатит-спленомегалии (hepatit-splenomegaly, HSS) (2). При вирусном гепатите Е кур отмечается снижение яйценоскости и повышается смертность. Гистологически заболевание характеризуется неспецифическим гепатитом, однако при HSS отмечают фибриноидный некроз, инфильтрацию лимфоцитами, перифлебит и накопление гомогенного эозинофильного белка в синусах печени.
Вирус гепатита Е (HEV), принадлежащий к семейству Hepeviridae, — икосаэдрический, безоболочечный, содержащий одноцепочечную РНК вирус с положительной полярностью (3) К настоящему времени идентифицированы четыре генотипа вируса гепатита Е, из которых 3-й и 4-й генотипы поражают сельскохозяйственных животных (соответственно свиней и кур). Однако 4-й генотип вирусу гепатита Е кур присвоен предварительно и этот вирус занимает в настоящее время промежуточное положение в семействе (8). Возможно, что в будущем ему будет присвоен статус рода.
Вирусный гепатит кур зарегистрирован в Австралии (4), США (5, 6), Испании (7), Венгрии (9), Италии (10) и Китае (11). В России случаи гепатита Е кур пока не идентифицированы с помощью молекулярно-биологических методов, однако есть сообщения, что на птицефабриках России вирус уже циркулирует и даже имеются данные о серопозитивности около 18,3 % кур (12).
Целью нашей работы была генетическая идентификация возбудителя вируса гепатита Е кур в России.
Методика. В течение 2009-2010 годов проводили патологоанатомические исследования и ПЦР-анализ биологического материала (образцы ткани печени и желчь) от кур-несушек с признаками гепато- и спленоме-галии, содержавшихся на бройлерной птицефабрике, где в родительском стаде отмечалось снижение яйценоскости и повышение смертности.
Суммарную РНК получали из гомогената желчи и печени с ис-
пользованием набора для выделения нуклеиновых кислот с сорбентом Nu-cleoS+ («Биоком», г. Москва) в соответствии с инструкцией изготовителя. Гнездовую полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) выполняли согласно описанному протоколу с помощью прибора «Терцик» («ДНК-технологии», г. Москва), применяя праймеры на ген хеликазы и капсидного белка (13). Для проведения реакции использовали реактивы и Taq-полимеразу фирмы «Promega» (США). Продукты ПЦР разделяли в 1 % агарозном геле с бромистым этидием; результат считали положительным при наличии ампликонов ожидаемой длины (13). Все положительные образцы секвенировали с использованием соответствующих праймеров на автоматическом секвенаторе ABI Prism 3130 («Applied Biosystems», США).
Полученные последовательности сравнивали с референтными последовательностями из GenBank (National Center for Biotechnology Information — NCBI). Выравнивание последовательностей проводили с помощью программы Clustal W, построение дендрограмм — используя алгоритм «neighbour-joining» со значением бутстреп-параметра 1000 повторов (MEGA 3.1).
Результаты. В 2009-2010 годах наше внимание привлекла необычная болезнь кур-несушек из родительского стада бройлеров — синдром большой печени и селезенки. Ветеринарные врачи птицефабрик направляли образцы патологического материала на исследование с целью исключения болезни Марека, лейкозов и аденовирусных инфекций, поскольку при этих заболеваниях отмечаются сходные изменения. При патологоанатомическом исследовании печени кур с признаками гепато- и спленомега-лии мы наблюдали клинические проявления, характерные для вирусного гепатита Е (рис. 1, см. 3-ю страницу обложки).
При тестировании на другие патологические агенты (вирусы болезни Марека, лейкоза, возбудители аденовирусных инфекций) был получен отрицательный результат (данные не представлены). Идентификацию вируса гепатита Е кур с помощью гнездовой ПЦР проводили с использованием обеих пар праймеров (12), однако положительный результат дали только праймеры на ген капсидного белка ORF 2 (рис. 2). Мы предполагаем, что отсутствие положительной реакции на ген хеликазы вируса гепатита Е кур связано с высокой генетической вариабельностью выявленного нами изолята, однако для доказательства этого требуется дополнительный генетический анализ.
А_____Б____В OK М Рис. 2. Электрофореграмма продуктов полимеразной
I пенной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР), I полученных при анализе образцов патологического ма-I териала (ткани печени и желчь от кур с признаками ге-I пато- и спленомегалии из родительского стада бройлерного I хозяйства па территории Российской Федерации) на на-I ёичие вируса гепатита Е кур (aHEV): А — отсутствие \ : . г продуктов амплификации ДНК гена хеликазы вируса
I гепатита Е кур; Б и В — положительный результат г — — : : >■. ‘ амплификации ДНК гена капсидного белка ORF2
I вируса гепатита Е кур (длина фрагмента 242 п.н.); ОК — отрицательный контроль; М — маркер молекулярных масс с шагом 100 п.н. (100 bp DNA Ladder, UAB «Fermentas», Литва).
Положительные результаты амплификации подтвердило секвени-рование с использованием прямого и обратного праймеров на ген ORF2. На основе анализа нуклеотидной последовательности фрагмента гена кап-
сидного белка ОКР2 была построена дендрограмма (рис. 3). Интересно, что обнаруженный нами изолят вируса гепатита Е кур, обозначенный как аИЕУ16050, не вошел ни в одну из генетических групп, представленных на дендрогрмме. Более того, у аНЕУ16050 генетическая гомология по последовательностям из ОепБапк для гена ОЯБ2 вируса гепатита Е составила 61,6-78,6 %.
Рис. 3. Дендрограмма, отражающая филогенетическое родство между изолятом вируса гепатита Е, выявленным у кур из родительского стада в бройлерном хозяйстве на территории Российской Федерации (аИЕУ16050), и другими известными изолятами. Дендрограмма построена с помощью алгоритма «пе^Ьошг-‘ошщ?» на основании нуклеотидной последовательностей фрагмента гена капсидного белка ОИР2. Для сравнения в качестве внешней группы выбрана аналогичная последовательность вируса гепатита Е свиней.
Последовательность, которая была получена нами для изолята вируса гепатита Е, выявленного у кур из родительского стада в бройлерном хозяйстве на территории Российской Федерации, в настоящее время депонирована в базе данных ОеиБаик под номером ^814691.
Важно отметить, что детекция вируса гепатита Е кур осуществляется главным образом методом ОТ-ПЦР, поскольку размножение вируса в культуре клеток и с использованием куриных эмбрионов представляет значительные трудности (14, 15).
Таким образом, описан первый случай генетической идентификации вируса гепатита Е кур в России. Полученные результаты позволят практикующим ветеринарным врачам правильно диагностировать сходные клинические проявления у поголовья на птицефабрике.
1. Payne C.J. Big liver and spleen disease. In: Diseases of poultry /Y.M. Saif, H.J. Barnes, J.R. Glisson, A.M. Fadly, L.R. McDougald, D.E. Swayne (eds.). Ames, Iowa State Press, 2005: 1184-1186.
2. Shivaprasad H.L. Hepatitis splenomegaly syndrome. In: Diseases of poultry /Y.M. Saif, H.J. Barnes, J.R. Glisson, A.M. Fadly, L.R. McDougald, D.E. Swayne (eds.). Ames, Iowa State Press, 2003: 1186-1188 (on CD-ROM not in book).
3. Emerson S.U., Anderson D., Arankalle A. et al. Genus Hepevirus. In: Virus taxonomy: eighth report of the International Committee on Taxonomy of Viruses /C.M. Fauquet, M.A. Mayo, J. Maniloff, U. Desselberger, L.A. Ball (eds.). Elsevier, Academic Press, London, United Kingdom, 2004: 853-857.
4. Payne C.J., Ellis T.M., Plant S.L., Gregory A.R., Wilcox G.E. Sequence data suggests big liver and spleen disease virus (BLSV) is genetically related to hepatitis E virus. Vet. Microbiol., 1999, 68: 119-125.
5. Haqshenas G., Shivaprasad H.L., Woolcock P.R., Read D.H., Meng X.J. Genetic identification and characterization of a novel virus related to human hepatitis E virus from chickens with hepatitis splenomegaly syndrome in the United States. J. Gen. Virol., 2001, 82: 2449-2462.
6. Haqshenas G., Huang F.F., Fenaux M., Guenette D.K., Pierson F.W., Larsen C.T., Shivaprasad H.L., Toth T.E., Meng X.J. The putative capsid protein of the newly identified avian hepatitis E virus shares antigenic epitopes with that of swine and human hepatitis E viruses and chicken big liver and spleen disease virus. J. Gen. Virol., 2002, 83: 2201-2209.
7. Peralta B., Biarnes M., Ordonez G., Porta R., Martin M., Mateu E., Pina S., Meng X.J. Evidence of widespread infection of avian hepatitis E virus (avian HEV) in chickens from Spain. Vet. Microbiol., 2009, 137: 31-36.
8. Meng X.J., Anderson D.A., Arankalle V.A., Emerson S.U., Harrison T.J., Jameel S., Okamoto H. Hepeviridae. In: Virus taxonomy, 9th Report of the ICTV. King AMQ /MJ. Adams, E.B. Carstens, EJ. Lefkowitz (eds), Elsevier Academic Press, London., 2011: 1021-1028.
9. Morrow C.J., Samu G., M a trai E., Klausz A., Wood A.M., Richter S., Jaskulska B., Hess M. Avian hepatitis E virus infection and possible associated clinical disease in broiler breeder flocks in Hungary. Avian Pathol., 2008, 37: 527-535.
10. Massi P., Tosi G., Gelmetti D., Lavazza A., Lombardi G., Torco-l i G. Big liver and spleen disease in broiler breeders in Italy. Ital. J. Anim. Sci., 2005, 4: 303-305.
11. Zhao Q., Zhou E.M., Dong S.W. et al. Analysis of avian hepatitis E virus from chickens, China. Emerg Infect Dis., 2010, 16(9): 1469-1472.
12. Токарев О.И. Патоморфологическая характеристика тимуса и селезенки кур при вирусном гепатите Е. Автореф. канд. дис. Воронеж, 2012.
13. Sun Z.F., Larsen C.T., Dunlop A., Huang F.F., Pierson F.W., Toth T.E., Meng X.J. Genetic identification of avian hepatitis E virus (HEV) from healthy chicken flocks and characterization of the capsid gene of 14 avian HEV isolates from chickens with hepatitis splenomegaly syndrome in different geographical regions of the United States. J. Gen. Virol., 2004, 85: 693-700.
14. Haqshenas G., Shivaprasad H.L., Woolcock P.R., Read D.H., Meng X.J. Genetic identifi cation and characterization of a novel virus related to human hepatitis E virus from chickens with hepatitis-splenomegaly syndrome in the United States. J. Gen. Virol., 2001, 82: 2449-2462.
15. P a y n e C.J., P l a n t S.L., E l l i s T.M., H i l l i e r P.W., H o p k i n s o n W. The detection of the big liver and spleen agent in infected tissues via intravenous chick-embryo inoculation. Avian Pathol., 1993, 22: 245-256.
ФГБУ Федеральный центр охраны здоровья животных,
600901 г. Владимир, мкр. Юрьевец, ФГБУ «ВНИИЗЖ» e-mail: sprygin@arriah.ru, irza@arriah.ru
HEPATITIS SPLENOMEGALY SYNDROME, A NEWLY IDENTIFIED HEN VIRAL DISEASE IN RUSSIA
V.N. Irza, A.V. Sprygin S u m m a r y
For the first time in Russia, the viral agent of hepatitis splenomegaly syndrome, a disease
Поступила в редакцию 25 марта 2012 года
of laying hens from broilers’ parental flock, has been identified by the use of RT-PCR (reverse transcription — polymerase chain reaction). On a poultry farm a low laying ability and high death of sick birds were examined, and the dissection revealed the bloody liquid in abdominal cavity, the hepato-and splenomegaly, the hepatic subcapsular hematomas and a breakable consistence of the liver. The viruses that cause similar clinical symptoms (adenovirus, Marek’s disease virus, leucosis virus) were not found. The sequence analysis of DNA fragment of ORF2 capsid protein gene of isolated virus and subsequent comparison with analogous sequences from GenBank database (NCBI) confirmed the identity of the agent to hepatitis E virus. Amplicon sequencing showed 61.6-78.6 % homology to the sequences from GenBank for capsid protein ORF2 gene of hepatitis E virus.
МЕЖДУНАРОДНАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ «ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ И МЕДИЦИНСКИЕ БИОТЕХНОЛОГИИ» (20-22 марта 2012 года, г. Москва)
Мероприятие проводилось в рамках традиционного Московского международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (организатор — ЗАО «Экспо-биохим-технологии»). Пленарное заседание конференции посвящалось фундаментальные исследованияv в биофармацевтике (научные руководители — академик РАН, заместитель директора Института биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Председатель научного Совета Пущинского научного центра РАН А.И. Мирошников (г. Москва), академик РАН, директор Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН В.В. Власов (г. Новосибирск).
На секции «Фармацевтические биотехнологии в ветеринарии» (научный руководитель — академик РАСХН, профессор, директор Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности А.Я. Самуйленко) рассматривались вопросы разработки и моделирования управляемых процессов культивирования микроорганизмов при производстве бактериальных препаратов, обеспечения безопасной работы биопредприятий, животноводческих комплексов и перерабатывающих предприятий АПК, качества биофармпрепаратов для животноводства России, стандартов для оценки качества антирабических вакцин.
Тематика докладов секции «Биофармацевтические препараты» — рекомбинантные терапевтические белки, белки плазмы крови, вакцины, терапевтические моноклональные антитела, лекарства на основе растительного сырья. В рамках секции «Биотехнология генноинженерных продуцентов» обсуждался опыт промышленного производства генно-инженерных лекарственных препаратов, секция «Клеточные технологии в медицине» посвящалась вопросам применения стволовых клеток (мезенхимальные стволовые клетки, коррекция репродуктивных функций, нейральные стволовые клетки в терапии, фундаментальные основы модуляции функций эндогенных стволовых клеток). На секции «Современные подходы к разработкам биофармацевтических средств» рассматривались особенности организация доклинической и клинической оценки эффективности и безопасности биофармпрепаратов.
Специальные секции посвящалась вопросам биоинформатики (внутриклеточные сети, системная биология сложных заболеваний, информационные и вычислительные Интернет-ресурсы для медицины и фармацевтики) и современным инструментальным методам исследования (микроскопия, масс-спектрометрия). В тематике секции «Фармацевтические кластеры и развитие фармацевтической промышленности. Интеллектуальная собственность» были отражены особенности формирования кластеров, экономика и менеджмент, стандартизация биофармацевтических продуктов, регистрация импортных и отечественных биофармпрепаратов в РФ.
На конференции состоялся конкурс молодых ученых, который традиционно проводится в рамках Московского международного конгресса «Биотехнология: состояние и перспективы развития». Одновременно с конференцией проводилась выставка, на которой были представлены современные технологические разработки и проекты, а также приборы, оборудование, реактивы для биофармацевтических исследований.
Информация и контакты: http://www.mosbiotechworld.ru
Кульчин Ю.Н., Вознесенский С.С., Безвербный А.В. Фотоника биомине-ральных и биомиметических структур и материалов. М.: изд-во «Физматлит», 2011, 224 с.
Монография, в которой проанализировано текущее состояние, результаты комплексных исследований природных биоминералов позволяет с единых позиций взглянуть
на проблемы биоминерализации в живой природе и поиск путей ее биомиметического моделирования применительно к перспективам развития такой многообещающей области исследований, какой является нано- и мик-рофотоника. Книга может быть полезна специалистам, работающим в области биофизики, фотоники, нано- и биотехнологий.
источник
Во многих письмах есть жалобы на то, что сильно болеют куры. При осмотре внутренностей погибшей птицы печень увеличена и на ней подозрительные белые пятна. Читатели спрашивают, какой болезнью они поражены и как их лечить.
Скорее всего, куры больны туберкулезом. Впрочем, похожие признаки обнаруживают и при болезни Марека, и при лейкозе. При туберкулезе у птицы печень, селезенка, иногда и почки увеличены, деформированы, на них заметны узелки величиной от просяного зерна до лесного ореха желтовато-сероватого цвета, мягкие или плотные. В начале заболевания они заполнены беловатым сметанообразным гноем, который потом становится творожистым. При сильном поражении бугорки обнаруживают в кишечнике и в яичниках.
Мясо неистощенных кур можно употреблять в пищу, но его надо хорошенько проварить. Тушки павшей и истощенной птицы надо уничтожить, лучше всего сжечь. Возбудитель туберкулеза довольно устойчив. В земле и навозе микробы сохраняются в течение года, столько же времени — в зарытых тушках и трупах животных. Разумеется, нельзя скармливать тушки туберкулезных кур домашним животным в сыром виде — только основательно проваренными.
Даже если тушка забитой туберкулезной курицы вполне приличная, обмускуленная, внутренние органы надо уничтожить (сжечь). Яйца от таких кур проваривают не менее 15 мин. Инструменты, которыми пользовались при разделке тушки, кипятят в 5-проц. растворе соды не менее 10 мин. Пух и перо от больных птиц кипятят не менее получаса.
Всех старых кур придется забить, помещение очистить от навоза и грязи, а затем продезинфицировать 3-проц. горячим раствором едкого натра (можно использовать садовый опрыскиватель). После первой дезинфекции надо открыть все окна и двери — проветрить. Возбудитель туберкулеза не любит солнца и свежего воздуха. Через две недели стены, потолок, пол — все отскабливают и дезинфицируют еще раз. А потом снова повторить через две недели. Очищают и обеззараживают весь инвентарь, а малоценный вообще сжигают.
Только после этого можно заводить новое поголовье. Постарайтесь проверить на туберкулез всю живность, которая есть в хозяйстве. Отнеситесь к делу серьезно, имейте в виду, что проблема туберкулеза в последнее время стала весьма острой.
источник
Куры – лидеры домашнего птицеводства. Сегодня их разведение популярно в самых разных странах мира. Оно дает возможность обеспечивать население ценным мясом и незаменимыми яйцами.
Птицеводство представляет собой сложнейший процесс, протекающий в настоящее время с применением новейших приемов. Эффективно организовано производство бройлеров, сформированы оптимальные среды для искусственного получения куриных яиц.
Несмотря на все это, для фермеров важнейшей проблемой являются различные заболевания печени у кур. Часто ими страдают молодые особи и недавно появившиеся на свет цыплята. Печень кур постоянно страдает от нерационального кормления и содержания, так как через данный орган проходят абсолютно все вещества из внешней среды.
При любом подозрении на болезнь обратите внимание на:
- перьевой покров (у здоровых животных он гладкий и блестящий);
- двигательную систему и координацию (здоровые особи уверенно передвигаются по хозяйству и твердо стоят на месте);
- систему пищеварения (куры должны иметь отличный аппетит и постоянно испражняться);
- дыхание (обычно птицы дышат часто и с закрытым клювом, без каких-либо хрипов и других звуков).
При обнаружении отклонений нужно изолировать особь и показать ее ветврачу.
Заболевания печени у кур встречаются довольно часто. Они бывают незаразные и заразные.
При этом в любом случае мясо больных особей нельзя употреблять в пищу.
К заразным болезням печени кур относится колигрануломатоз, гистомоноз, а также кокцидиоз:
- Колигрануломатоз вызывает не только поражение печени, но и кожных покровов, слепой кишки. Болезнь проявляется в общей слабости и потере веса, аппетита. Сережки и гребни куриц приобретают синий цвет;
- Гистомоноз наблюдается больше всего у молодых. Отмечается снижение аппетита, активности, опускаются крылья, перья становятся тусклыми. Спустя 1 — 4 суток после заражения появляется понос зеленовато-бурого цвета с неприятным резким запахом. Через некоторое время птица заметно худеет, развиваются застойные явления. Кожа головы особи становится темно-синего цвета, у молодой птицы — черного.
- Чтобы избежать болезни необходимо содержать молодых птиц отдельно от взрослых, регулярно проводить дегельминтизации против возбудителей гистомоноза;
- Кокцидиоз – паразитное заболевание, вызывающееся кокцидиями. Кокцидиозом друг от друга может переболеть все хозяйство. Обычно им заболевают молодые птицы, возраст которых от двух до двенадцати недель. Взрослые куры не болеют им, но при этом могут быть лишь переносчиками этого паразита. При данной болезни поражаются такие органы как печень, кишечник, почки.
Симптомы заболевания очень напоминают болезнь Марека и инфекционный бронхит. Домашние птицы постоянно поносят, скапливаются около источников тепла, с трудом передвигаются, отказываются от пищи. Внешне больная птица имеет взъерошенный вид и гребешок бледного цвета.
- рацион питания с высокой долей насыщенных жиров. Куриный организм не может справиться с повышенным содержанием жира в корме, он начинает откладывать его про запас;
- частое кормление;
- болезни щитовидной железы;
- диабет. Обычно он передается по наследству;
- частное использование химических элементов в хозяйстве.
- возбудителем данной болезни печени кур является кишечная палочка – Escherichia coli. Она активно прогрессирует в питательных средах при температуре 37 °С до 8 недель: в навозе, почве, воде, помещениях.
- простейшие типа Protozoa, подтипа Apicomplexa, класса Faggelatta, вида Histomonas meleagridis – это главные возбудители заболевания печени куриц. Они поражают как печень, так и слепые кишки. Болезнь сопровождается интоксикацией всего организма. Курица сильно отстает в развитии, теряет вес, плохо несет яйца. В организме животного болезнь вызывается жгутиковым или безжгутиковым одноклеточным.
- возбудителем кокцидиоза являются простейшие организмы — кокцидии, а также эймирия тенелла. Они попадают в организм домашней птицы через еду, воду, инвентарь.
Кокцидиоз, вызванный паразитическими простейшими, повреждает в первую степень стенки кишечника цыплят. Существует целый перечень типов кокцидиоза: безвредные для птицы, и опасные для жизни особи. Опасные возбудители, как правило, живут в области кишечника.
Кокцидиоз оказывает сильное влияние на молодняк. По причине общих токсических процессов у них начинаются сбои в работе внутренних органов, нарушается структура слизистых кишечника, клетки начинают отмирать.
Из-за кокцидиоза кур в организме накапливаются вредные вещества, наблюдается общая интоксикация организма цыплят. Болезнь в кротчайший период времени может поразить многие части кишечника. На фоне всего этого птица начнет плохо себя чувствовать и усваивать пищу, она будет подвержена другим разным опасным инфекциям.
Что такое синусит и как его вылечить? Узнайте ответы на все вопросы, прочитав нашу статью.
Выгодно ли разводить гусей на мясо как бизнес? Все плюсы и минусы мы опсиали здесь.
Для лечения вышеописанных болезней следует применить следующие способы:
- Ожирение. Больных птиц необходимо правильно кормить – пищей с достаточным содержанием полезных веществ. Следует давать препараты, улучшающие деятельность печени (Холин, Бетанин, Лецетин, Метионин и т.д.). Эти лекарственные средства способны быстро расщеплять корм и уничтожать лишние жировые отложения.
- Колигрануломатоз. При лечении больных кур нужно строго выполнять все предписания ветеринара. Обычно курам, страдающим этим заболеваниям, прописывают антибиотики широкого спектра действия, а также йодистые препараты.
- Гистомоноз. Для лечения этой болезни существует достаточное количество препаратов. Главное, нужно вовремя определить заражение. Больных особей стоит перевести в отдельный загон, обеспечить доступ к воде и пище. Лучший эффект в борьбе с болезнью показывают препараты Метронидазол, Фуразолидон, Фенотиазин, Тинидазол, Нитазол и другие.
- Кокцидиоз. Определив инфицированную птицу, ее нужно срочно отделить от других особей. На данный момент нет единого препарата, способного справится с болезнью. Ветеринары назначают лишь профилактические средства: Кокципродин, Аватек, Кокцидиовит, Байкокс.
Любые домашние животные, в том числе куры, подвержены самым разным заболеваниям. Если вы хотите сохранить хозяйство, то внимательно следите за здоровьем птиц и их содержанием. Именно такой подход способен обеспечить их отличную продуктивность.
источник
В условиях постоянного неправильного кормления и содержания у домашней птицы в первую очередь страдает печень.
Именно через этот орган проходят практически все элементы, попадающие в организм курицы.
Очень часто неправильное содержание птицы становится причиной ожирения печени, которое в будущем может стать причиной гибели птицы.
В этой статье мы поговорим про ожирение печени у кур или печеночный липидоз. Вы узнаете, что из себя представляет заболевание и как его лечить.
Ожирение печени (или печеночный липидоз) может быть врожденным или приобретенным нарушением обмена жиров в организме птицы.
Это довольно опасное заболевание, которое практически сразу отражается на яйценоскости курицы. Именно поэтому на липидоз нужно проверять кур яичных пород, чтобы вовремя им помочь в случае постановления этого диагноза.
Дело в том, что в первую очередь у птицы снижается количество яиц, которое она может снести. А это, в свою очередь, отражается на общей доходности хозяйства. Впоследствии, птица может очень быстро погибнуть. После гибели ее мясо уже нельзя никак использовать в хозяйстве.
Ожирение печени у кур может проявиться по нескольким причинам. Одной из наиболее распространенных является рацион с повышенным содержанием жиров.
Организм курицы физически не может обработать высокую концентрацию жира в корме, поэтому он начинает постепенно откладывать его в организме, что напрямую отражается на здоровье птицы.
Также печень может покрыться дополнительным жировым слоем из-за очень частого кормления. Многие фермеры ошибочно полагают, что чем больше корма они дадут птице, тем быстрее она вырастет и наберет массу.
Это не совсем так, потому что птицы не могут переварить слишком большое количество зерна. Постепенно оно откладывается, оказывая давление не только на печень, но и на другие внутренние органы.
Любые болезни щитовидной железы также могут стать причиной ожирения печени. В организме домашней птицы нарушается жировой обмен, который контролируется этой железой, поэтому жир начинает обильно откладываться в организме.
Такое же действие имеет диабет. Это заболевание может передаваться по наследственности, поэтому за геномом курицы нужно тщательно следить. В особенности это касается ферм, где производится селекционный отбор птицы.
Кроме того, нужно быть аккуратным в использовании химикатов на территории фермы.
Первый признак ожирения печени – это массовое снижение яйценоскости у кур несушек. По примерным подсчетам оно падает на 35%.
При этом смертность птицы увеличивается на 5%. Однако при этом куры-несушки выглядят хорошо, активно ходят по двору во время выгула.
У здоровых на вид несушек часто обнаруживают излишнюю массу тела. Она может на 30% превышать норму из-за того, что в брюшной полости начинается активное отложение жира.
Постепенно гребень курицы и сережки становятся бледными и увеличиваются в своих размерах. По истечении некоторого срока времени кончик гребня синеет.
Во время ожирения, печень птицы увеличивается на 60%. Настолько большой внутренний орган сильно растягивает окружающие мышцы, образовывая брюшную грыжу. На этой части тела у курицы выпадают перья, образовывается кровяная корка. При этом даже через кожу просматривается желтая прослойка жира, которая может достигать 3 см в толщину.
Для диагностики ожирения печени ветеринары используют осмотр птицы и ее взвешивание.
Любое превышение массы может стать подозрением на липидоз печени. Также на поздних стадиях у птицы на животе начинают выпадать перья, открывая взгляду желтушную кожу.
К сожалению, на ранних стадиях заболевания сложно понять, страдает ли птица от ожирения или нет. Именно поэтому у кур берут сыворотку крови на анализ.
В лабораторных условиях определяется уровень содержания мочевины, билирубина и креатина. У совершенно здоровой несушки эти показатели должны составлять 2,3-3,7, 0,12-0,35, 0,17-1,71 мкмоль/л соответственно.
Заболевших птиц необходимо кормить специальными обезжиренными кормами, которые богаты на содержание полезных витаминов и микроэлементов.
Они помогут больным птицам справиться с заболеванием. Кроме этих лечебных мер, можно давать препараты, которые улучшают работу печени. К таким медикаментам относят липотропы: лецитин, холин, инозитор, бетанин и метионин.
Лецитин способен существенно снизить аппетит курицы. Она станет потреблять меньшее количество корма, используя свои собственные жировые запасы.
Постепенно они начнут уменьшаться и печень курицы будет работать нормально. Холин, инозитор, бетанин и метионин помогают расщеплять корм, а также способствуют уничтожению лишних жиров.
Самой эффективной профилактикой ожирения печени у кур считается правильное кормление.
Ни в коем случае нельзя перекармливать птицу и заставлять ее сильно голодать. Куры должны получать равномерное количество полезных веществ в корме, чтобы пищеварительная система работала правильно.
Однако с целью профилактики курам-несушкам можно давать селен в дозе 1 мг/кг , сочетая его с метионином в концентрации 0,5 г/кг комбикорма. Эта смесь поможет избежать ожирения печени.
Для этих же целей на птицефермах применяется медный купорос (60 мг), холинхлорид (1,5 г), метионин (0,5 г), витамин В (6 мг/кг корма). Эту смесь необходимо давать несушкам в течении недели.
Ожирение печени – это неприятное заболевание, которым чаще всего страдают куры-несушки. Оно напрямую отражается на количестве снесенных яиц, поэтому фермерам нужно внимательно следить за своими птицами.
Лучше сразу подобрать правильные и эффективные гепатопротекторы, способствующие правильному обмену веществ, чем потом считать убытки, нанесенные смертью птицы или невыполнением плана по количеству яиц.
Периодически из-за неправильного питания происходит закупорка зоба у кур. О том, как лучить, читайте здесь.
Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.
источник