Интенсификация молочного животноводства и перевод его на промышленную основу предъявляют повышенные требования к состоянию крупного рогатого скота. В настоящее время в условиях средней полосы России широко применяется холодный метод содержания молочного поголовья, при котором практикуется содержание скота с первых дней жизни без регуляции параметров микроклимата, что идет вразрез с климатическими особенностями наших регионов. По действующим требованиям к микроклимату коровников они должны быть оборудованы системами вентиляции и отопления, чтобы обеспечить в помещениях температуру 10 0С и относительную влажность не выше 75 %. Эти нормативные параметры необходимо поддерживать в течение всего периода эксплуатации животных. Т.е. «холодное содержание» действует в нарушение этих норм. Несоответствие факторов микроклимата физиологическим потребностям организма вызывает систематические функциональные нарушения, предрасполагающие к развитию таких заболеваний как маститы, копытная гниль и т. д. В связи с этим важным является изучение беспривязно-боксового холодного способа содержания коров, характеризующегося наиболее широким спектром стрессирующих факторов [9; 10].
Высокопродуктивные животные, обладая интенсивным обменом веществ и энергии, склонны к нарушениям гомеостаза, сохранение которого сопровождается напряжением компенсаторных механизмов. Величина энергозатрат на приспособление к неблагоприятным условиям, так называемая «цена адаптации», при этом возрастает. Для сельскохозяйственных животных это выражается в непроизводительном расходовании кормов и снижении продуктивности. Анализ биохимических параметров крови позволяет судить о состоянии углеводного, белкового, липидного обменов, выявить непродуктивные энергозатраты организма [1; 3; 5; 6].
Цель работы — изучить биохимические параметры крови коров при воздействии отрицательных температур разного диапазона, в условиях беспривязно-боксового холодного способа содержания.
Материал и методы исследования
Экспериментальная часть работы была выполнена в условиях молочно-товарной фермы «Петровка — 1» Белгородского района, где содержится 150 голов коров красно-пестрой голштино-фризской породы. В хозяйстве применяется холодный беспривязно-боксовый способ содержания. Исследование особенностей адаптации коров к воздействию низких температур осуществлялось в двух сериях эксперимента: в первой — изучали адаптацию коров к воздействию температуры -5 0С, во второй: -20 0С, поголовье контрольной группы содержалось при температурных условиях +15 0С. Забор крови производился из яремной вены в одно время при одинаковых внешних условиях до утреннего кормления. В сыворотке крови определяли содержание общего белка; глюкозы; мочевины; креатинина; билирубина, ферментов аланинаминотрасферазы (АлАТ) и аспартатаминотрансферазы (АсАТ); холестерина; тимоловую пробу.
Результаты собственных исследований и их обсуждение
Показатели крови являются индикатором работы всего организма, они могут характеризовать уровень адаптации животных к различным стрессирующим факторам, в том числе и к конкретным условиям содержания [6]. В табл. 1 представлены биохимические показатели крови коров при воздействии температуры -5 0С.
Таблица 1. Биохимические показатели крови коров при воздействии температуры -5 0С
источник
Минеральные вещества и витамины, входящие в состав корма, являются для животных, важнейшими элементами питания. Недостаток и избыток их в рационах животных приносит животноводству значительный экономический ущерб за счет снижения продуктивности и плодовитости животных, вызывает заболевание и падеж, ухудшает качество продукции. Минеральные вещества и витамины в рационах должны поступать в организм животных в оптимальных количествах и соотношениях, строго в соответствии с потребностью высокопродуктивных животных. Они необходимы для роста и размножения животных, влияют на функции эндокринных желез, органов кроветворения, регулируют обмен веществ, принимают участие в биосинтезе белка, оказывают влияние на жизнедеятельность микрофлоры пищеварительного тракта и т.д.
Основным источником витаминов и минеральных веществ, для животных являются корма. В то же время минерально-витаминный состав каждого вида корма подвержен значительным колебаниям и зависит от типа почв, климатических условий, вида растений, фазы вегетации, проводимых хозяйствами агрохимических мероприятий, технологии уборки, хранения и подготовки заготовленных кормов к скармливанию и других факторов. Исходя из чего, в хозяйствах часто наблюдается в заготовленных кормах недостаток одних элементов и избыток других, что приводит к возникновению заболеваний, снижению продуктивности, нарушениям в воспроизводстве, ухудшению качества получаемого от коров молока и низкой эффективности использования кормов.
В современных условиях ведения животноводства контроль со стороны специалистов за обеспеченностью животных минеральными веществами и витаминами чрезвычайно важен, так как заболевания связанные с их недостаточностью, дисбалансом и токсичностью, получили сейчас широкое распространение. Дополнительно у животных появляются новые формы витаминно-минеральной недостаточности: остеохондрозы, токсикозы, остеодистрофии, артрозы, слабость конечностей, мышечные дистрофии у молодняка, послеродовые заболевания у высокопродуктивных коров (гипокальцемия, гипофосфатемия, анемия), нарушения в воспроизводительной функции, стрессоустойчивости и неспецифической резистентности организма, отравление экотоксинами, изменение поведения, образование камней в моче- и желчевыводящих путях, нарушение функции щитовидной железы, кислотно-щелочной дисбаланс и т.п.
На практике специалисты обычно наблюдают стертые и осложненные формы, что создает определенные сложности при постановке диагноза. Чаще всего нарушение витаминно-минерального обмена у животных протекает без каких-либо клинических признаков. К примеру, недостаточное или избыточное обеспечение животных минеральными веществами и витаминами ведет к снижению использования питательных веществ корма, продуктивности, качества продукции, воспроизводительной способности и устойчивости к болезням. Подобного рода субклиническую патологию специалисты имеют возможность определить только при проведении биохимического исследования у таких животных. При выявлении недостаточности или токсичности того или иного минерального элемента и витаминов необходимо учитывать все полученные данные: биохимические показатели крови, молока, органов, тканей, экскретов и волосяного покрова; содержание минеральных веществ в почве, воде и кормах; клинические признаки; уровень продуктивности; ответную реакцию организма на витаминно-минеральные добавки (премиксы).
У животных получающих несбалансированный по минеральным веществам рацион кормления отмечаем: ухудшение аппетита, использование питательных веществ корма, снижается воспроизводительная функция и продуктивность, шерстный покров становится тусклым и взъерошенным. Проявлением недостаточности или токсикоза минеральных веществ, служат такие болезни животных, как паракератоз, рахит, сухотка, зоб, тетания, флюороз, анемия и другие. Когда минеральный элемент тесно связан с одним органом или одной функцией организма (например, йод со щитовидной железой), мы будем иметь дело с однообразной и довольно специфической клинической картиной. В то же время специалисты при наличии у животного заболевания зобом должны учитывать, что зоб могут вызвать и гойтрогенные вещества, содержащиеся в рапсе, капусте, сурепке, льняном шроте, белом клевере, соевых бобах, горохе и др., а также некоторые лекарства. Недостаточность таких элементов, как медь и цинк, проявляется весьма своеобразно, в связи с участием их в биосинтезе многих ферментов. Дефицит минеральных веществ у животных может быть вторичным или комплексным, а также возможно одновременное проявление недостатка одного элемента и избытка другого: Си и Zn,Си и Мо, Сd и Zn, Mn и Fe,Cu и Pb.
Доказано, что определенные метаболические процессы могут нарушаться как при недостатке, так и избытке многих элементов. К примеру, аналогичные или очень близкие поражения костного скелета бывают при недостатке Са, Р,Mn,Cu, Mn, Zn, Si, витаминов А и D,а также при избытке Mo, F, Sr, витамина D. Анемию также может вызвать недостаток Fe, Cu, Co, некоторых витаминов или избыток в рационе Mn,Mo,Zn, Cu, Pb,Se. Снижение и извращение аппетита у животных бывает при дефиците Ca, P, Na, Co, Cu,Zn и при избытке многих элементов. Учитывая вышеизложенное специалисты хозяйств при оценке статуса минеральных веществ и витаминов основное свое внимание должны уделять своевременному выявлению у высокопродуктивных животных субклинических стадий их недостаточности, токсикоза и организации необходимых профилактических мероприятий.
Уровень кальция в крови здоровых животных зависит от содержания в рационе Ca,P, Mg, витамина D в рационе, от состояния гормональной системы, желудочно-кишечного тракта, почек и других органов.
Содержание кальция в крови понижается при длительном дефиците его в рационе, плохом усвоении вследствие недостатка витамина D и паратгормона. Гипокальцемия сопровождает остеодистрофию, рахит, послеродовой парез, гипофункцию околощитовидных желез. Гипокальцемия у животных может быть при нефрозе и нефрите. При субклинической форме недостаточности кальция в плазме (сыворотке) крови животных снижается концентрация кальция (ниже 8,0 мг %), повышается активность щелочной фосфатазы, содержание неорганического фосфора и магния; в моче увеличивается концентрация фосфора, магния, оксипролина; в костной ткани повышается (в 2-3 раза) активность щелочной фосфатазы, снижается содержание золы, Cа,P, Mg; уменьшается плотность и прочность костей.
При избытке кальция в корме (2% на сухое вещество) концентрация этого элемента в плазме крови возрастает в 1,4 раза, содержание неорганического фосфора снижается в 3 раза, активность щелочной фосфатазы не изменяется. Повышение кальция в крови у животных может быть при передозировке витамина D, гиперфункции паращитовидных желез.
Все виды обмена веществ в организме животных неразрывно связаны с превращением фосфорной кислоты. Уровень фосфора в крови зависит от тех же факторов, что и содержание кальция. Недостаток фосфора в кормах рациона сопровождается снижением в плазме крови концентрации неорганического фосфора (менее 4мг%), повышением активности щелочной фосфатазы, содержания Mg и Ca; в моче снижается концентрация фосфора и увеличивается количество Mg и Ca (в 5-10 раз), оксипролина; в костной ткани уменьшается содержание фосфора, кальция, магния, золы; снижается плотность и прочность костей. Снижение фосфора в крови отмечают при длительном недостатке его в кормах рациона, плохом усвоении или расстройствах желудочно–кишечного тракта, при недостатке витамина D и паратгормона, при остеодистрофии, рахите, уровской болезни, пеллагре и других заболеваниях животных.
Избыток фосфора в кормах приводит к увеличению в плазме крови количества фосфора, снижению концентрации магния и не изменяет содержание в ней кальция и активности щелочной фосфатазы. Аналогичную картину можно наблюдать в моче животных. Гиперфосфатемию наблюдают при уменьшении секреции паратгормона, при сердечной недостаточности, кетозе, передозировке витамина D, нефритах, нефрозах, токсикозах, мышечном перенапряжении.
Гиповитаминоз D сопровождается в плазме крови возрастанием активности щелочной фосфатазы и снижением концентрации кальция, фосфора и магния. Избыток витамина D приводит к значительному увеличению содержания кальция и фосфора в плазме крови.
При недостатке магния в рационе происходит уменьшение концентрации магния в плазме крови (менее 1,7 мг %), моче и костной ткани, на фоне умеренного снижения содержания Р и Mg в костях, без существенного изменения концентрации Са и Р и активности щелочной фосфатазы. Недостаточность магния в крови у животных, при избытке калия и азота в рационе клинически проявляется симптомами пастбищной тетании, послеродового пареза, остеодистрофии, транспортной болезнью.
Недостаточность натрия, калия, хлора, серы на обычных товарных фермах с содержанием животных имеющих небольшую продуктивность встречается редко, так как животноводы в рацион кормления животных регулярно добавляют поваренную соль и серосодержащие аминокислоты. Однако у высокопродуктивных животных (5000кг и более) обычно наблюдается недостаточность Na и S, Cl. Дефицит хлора, даже когда в рацион не вводится поваренная соль встречается у животных крайне редко, а недостаточность калия может быть у жвачных при высококонцентратном типе кормления, ввиду того,что зерновые корма составляющие основу рациона при высококонцентратном типе кормления бедны калием. При дефиците калия, серы и хлора в организме у животных снижается их концентрация в плазме крови и моче. Избыток натрия, хлора, калия и серы из организма животных выделяется в основном с мочой.
Функция электролитов в организме животного это поддержание кислотно-щелочного баланса. Снижение щелочного резерва (резервной щелочности) в крови у животного ниже 40 об. % СО² свидетельствует о сдвиге кислотно-щелочного баланса в сторону ацидоза. Метаболический ацидоз регистрируется при высококонцентратном типе кормления коров, вторичной остеодистрофии, расстройствах желудочно кишечного тракта и функции почек, воспалениях. Дыхательный ацидоз у животных наблюдается при сердечной недостаточности и эмфиземе легких.
Недостаточность железа обычно встречается у молодняка и клинически проявляется микроцитарной гипохромной анемией. У лактирующих коров может встречаться железодефицитное состояние проявляющееся нормальной концентрацией гемоглобина на фоне снижения запасов железа в тканях животного. При дефиците железа у телят происходит снижение концентрации этого элемента в плазме крови (≤ 65 мкг %), гемоглобина (≤80 г/л),гематокрита (≤30%), насыщенности трансферрина (≤25%), уменьшение количества эритроцитов (≤4,0*10 в 12степени/л) и увеличение общей железосвязывающей способности плазмы крови (≥ 100 мкмоль/л). Из приведенных выше показателей наиболее надежны для диагностики ранних форм недостаточности железа содержание этого элемента и ферритина в плазме крови, насыщенность трансферрина, концентрация гемоглобина. При избытке железа в рационе (1г/кг сухого вещества) содержание его возрастает в кишечнике, почках, селезенке и печени.
Недостаточность меди у животных субклинически сопровождается снижением церулоплазмина (в 10-15 раз) и содержания меди в плазме крови (менее 60 мкг%), а также уменьшением количества гемоглобина и эритроцитов. Нарушение защитного антимикробного механизма в нейтрофилах — самое раннее проявление недостаточности меди. Избыток меди в рационе животных приводит к накоплению элемента в печени, почках, стенке кишечника; при этом активность церулоплазмина и содержание меди в плазме крови существенно не изменяются, но наблюдается гипокальцемия. Избыток меди и церулоплазмина в крови наблюдают при заболеваниях печени, лейкемии, инфекционных заболеваниях, при беременности.
Недостаток цинка у коров сопровождается снижением его концентрации в плазме крови (ниже 50мкг%), костной ткани, печени, почках, поджелудочной железе, стенке кишечника, сердце, волосяном покрове, слюне.
При избытке цинка наблюдается повышение его содержания в основном в этих же тканях и органах. На долю эритроцитов приходится около 80% от общего количества цинка в крови, где он соединен главным образом с карбоангидразой; в связи с этим повышает содержание цинка в плазме. Концентрация цинка в сыворотке крови на 16% выше, чем в плазме. В практических условиях содержание цинка в плазме крови зависит от вторичных факторов (воспаления, инфекции, опухоли, стресса, избытка кальция, фосфора, меди, свинца, кадмия, фитина понижают цинкемию), возраста и физиологического состояния животных, их генетических особенностей. Клинически недостаточность цинка может возникнуть до существенного снижения его в крови и тканях. Эти же факторы способствуют усилению экскреции цинка с мочой. Наукой к настоящему времени обнаружено около 100 цинксодержащих ферментов, однако ни один из них пока не может быть использован в качестве надежного критерия статуса цинка в организме.
При недостатке цинка в организме снижается активность щелочной фосфатазы в плазме крови, печени, костях. Активность щелочной фосфатазы в плазме крови еще в большой мере зависит от вторичных факторов, чем от содержания цинка. Активность щелочной фосфатазы в плазме крови повышается при недостатке витамина D, остеодистрофии, рахите, гепатите, циррозе печени, а также в конце стельности из-за быстрого роста костной ткани плода. Примечательно, что у телят активность щелочной фосфатазы в 5-15 раз выше, чем у взрослых коров.
Содержание марганца в тканях животных мало изменяется как, при недостатке, так и при его избытке в кормах рациона.
При токсикозе животных содержание марганца возрастает в стенке кишечника, почках, коже, волосе, желчи и кале. При недостатке этого элемента в организме животных снижается активность аргиназы в печени, галактозилтрансферазы в костях, изоцитрат-и пируватдегидрогеназы в почках и мышцах, а также уменьшается концентрация и скорость сульфатирования гликозаминогликанов в хрящевой и костной ткани.
При недостатке в рационе кобальта, что наиболее часто наблюдается у жвачных в период пастбищного содержания, у животных снижается его концентрация в плазме крови (≤0,6 мкг %) и печени (≤0,1 мг/кг сухого вещества), но ввиду низкого содержания кобальта в тканях и биологических жидкостях данные показатели имеют для специалистов небольшую диагностическую ценность. Более объективным показателем является концентрация витамина В-12 в плазме крови (у крупного рогатого скота в норме 250-600 нг/л), печени и молоке. При недостаточности кобальта у жвачных резко снижается активность метилмалонил-КоА-мутазы и метионин-синтетазы, что приводит к накоплению в крови метилмалоновой и формиминоглутаминовой кислот и повышенной экскреции их с мочой. Определение в плазме крови метилмалоната (в норме ≤ 100 мкмоль/л) позволяет выявлять субклиническую форму недостаточности кобальта. При избытке кобальт накапливается в печени и почках.
При недостатке и избытке селена в рационе происходит быстрое изменение его содержания в плазме крови, эритроцитах, сердце, скелетных мышцах, печени, почках, костной ткани, легких, поджелудочной железе, волосе, коже, селезенке, молоко, моче, кале. При этом, в плазме крови и, особенно в волосе концентрация селена при недостатке селена снижается медленнее, чем в тканях. Более надежным прижизненным критерием недостаточности селена является активность селено зависимой глутатионпероксидазы в цельной крови. При дефиците селена в плазме крови возрастает активность аспарттатаминотрансферазы и креатинкиназы в два раз и более, что является следствием патологии мышечной ткани.
Определение содержания общего, белково-связанного, свободного, бутанол-экстрагируемого йода (БЭЙ) и тироксина в плазме крови позволяет выявить недостаток этого элемента; в то же время при избытке йода в рационе концентрация гормонов щитовидной железы и БЭЙ не увеличивается. При вторичной недостаточности йода, вызванной гойтрогенными веществами, содержание БЭЙ в крови также не изменяется, однако в моче при этом резко повышается уровень тиоцианатов. У лактирующих коров концентрация йода в молоке — наиболее яркий индикатор обеспеченности организма йодом. Волос у животных, особенно черный, также хорошо отражает статус йода, однако следует учитывать возможность его загрязнения, в том числе и за счет поглощения элемента из воздуха.
На сегодняшний день в природе известно более 50 каротиноидов, способных превращаться в организме животных в витамин А. Из них наиболее распространенный и эффективный — бета-каротин. Из одной молекулы оранжевого пигмента в организме животных образуется 2 молекулы витамина А. Бета-каротин, кроме участия в синтезе витамина А, имеет свои очень важные функции в организме. Он является природным антиоксидантом, повышает сопротивляемость организма к различным заболеваниям, улучшает воспроизводительную функцию, кроветворение и устойчивость организма к раковым заболеваниям, снижает риск сердечнососудистых заболеваний, воспаления слизистых оболочек, регулирует иммунные реакции, усиливает обмен энергии. Выявлена прямая зависимость между содержанием бета — каротина в организме и воспроизводительной способностью животных.
Ввиду того, что бета-каротин в процессе заготовки и хранения кормов быстро разрушается, обеспечить животных в зимнее- стойловый период бета –каротином в хозяйствах практически невозможно. Под действием света и высоких температур бета-каротин переходит в менее активные формы. Потребность животных в бета — каротине возрастает при избытке в рационе энергии, протеина, клетчатки, сульфатов, железа, тяжелых металлов, нитратов, нитритов, микотоксинов, прогорклых жиров, сапонинов, фитоэстрогенов, при воспаление кишечника, воздействии различных стресс факторов, при лечении кокцидиостатиками и некоторыми другими ветпрепаратами. Повышают усвоение бета-каротина витамины Е и В-12, оптимальные дозы фосфора, цинка, селена, кобальта и жира, углеводы.
Количество каротина в крови подвержено значительным сезонным колебаниям (0,4-1,0 мг% в стойловый период и более 1мг%- в пастбищный).
При дефиците каротина в корме снижается его содержание в крови. Снижение содержания каротина в крови у животных происходит в результате плохого его усвоения под влиянием многих вторичных факторов, гепатитах, гепатозах, недостатке в рационе белка, жиров, легкоусвояемых углеводов, при различных токсикозах в т.ч. нитратных.
Специалисты хозяйств и ветлабораторий должны учитывать тот фактор, что уровень каротина в сыворотке (плазме) крови при хранении образцов снижается, поэтому должны это учитывать при проведении анализов и интерпретации полученных результатов.
Наукой доказано, что в организме животных усваивается только 1/3-¼ часть поступившего в организм животного каротина и только 1/7 его часть превращается в витамин А. При этом от 25 до 50% витамина А депонируется в печени. Полноценное белковое кормление животных, хорошая обеспеченность рациона витамином В-12 и антиоксидантами существенно повышает эффективность превращения каротина в витамин А.
Концентрация витамина А в крови, так же как и каротина,подвержена значительным сезонным колебаниям (25-80 мкг% в стойловый период и 40-150 мкг%- в пастбищный). При снижении содержания витамина А в крови ниже 10мкг% и в печени ниже 50 мкг/г приводит к развитию у животных клинических признаков гиповитаминоза А. Снижение содержания витамина А в крови, печени, молозиве и молоке отмечают при недостатке каротина и витамина А в кормах рациона, плохом их усвоении вследствие имеющихся у животных хронических заболеваний желудочно-кишечного тракта и печени.
Снижение уровня общего белка в сыворотке крови (ниже 60г/л) бывает при длительном недокорме животных, неполноценном питании, остеодистрофии, хронических заболеваниях желудочно-кишечного тракта, почек и печени.
Мочевина является в организме животных основным конечным продуктом азотистого обмена. Процесс синтеза мочевины в организме жвачных животных происходит в печени и стенке рубца. Выделение мочевины из организма происходит главным образом почками. Концентрация мочевины в крови здоровых животных составляет 20-40 мг%, или 3,3-6,7 мкмоль/л. Резкое повышение содержания мочевины в крови (уремия) наблюдается при почечной недостаточности и других заболеваниях почек, а также при скармливании животным больших количеств зеленых бобовых кормов и передозировках в рационе синтетических азотистых веществ (мочевина и др.). В то же время уменьшение содержания мочевины в крови бывает при длительном белковом недокорме, при нарушении мочевинообразовательной функции печени. Данное явление часто бывает у коров с дистрофией печени в результате перенесенного ей кетоза.
Кетоновые тела (бета-оксимасляная кислота, ацетоуксусная кислота, ацетон) промежуточные продукты обмена белков, жиров и углеводов. При повышение уровня кетоновых тел у животных в крови, моче и молоке специалисты говорят о нарушении обмена веществ. Стойкая кетонемия встречается у коров при острой и подострой формах кетоза. При этом соотношение кетоновых тел меняется в сторону увеличения ацетона и ацетоацетата.
При острой форме кетоза в молоке и моче обнаруживаются ацетоновые тела (в моче до 100-500 при норме 5-10 мг%, в молоке до 20-80 при норме до 8 мг%), а в крови кетоновые тела (15-70 мг% и более при норме 1-6 мг%). При этом содержание сахара (глюкозы) в крови больных коров снижается до 30 мг% и ниже при норме 40-60 мг%, а резервная щелочность-ниже 40 об% СО².
У коров больных кетозом в крови увеличивается уровень ЛЖК, НЭЖК, молочной, пировиноградной кислот, тироксина. В рубцовом содержимом снижается рН, повышается концентрация масляной кислоты, аммиака, кетоновых тел.
При хроническом кетозе и вторичной остеодистрофии в крови содержание кетоновых тел повышено незначительно, снижается содержание гемоглобина, мочевины, кальция, резервной щелочности, сахара, а также происходит повышение в крови общего белка, активности аспартатаминотрансферазы и лактатдегидрогеназы.
Билирубин — желчный пигмент, образуется в клетках РЭС из гемоглобина разрушенных эритроцитов. В плазме крови билирубин образует непрочный комплекс с альбумином. Специалисты такой билирубин называют свободным или непрямым. Содержание такого билирубина в крови составляет 1-14 мкмоль/л. Такой билирубин из организма животных выводится с участием печени. В печени происходит экстрагирование билирубина из комплекса с альбумином и его соединение с глюкуроновой кислотой. Образовавшийся комплекс билирубина с глюкуроновой кислотой специалисты называют прямым билирубином. Прямой билирубин выделяется печенью в желчь и поступает в кишечник животного, где превращается в уробилиноген. В сыворотке крови здорового животного содержится в основном непрямой билирубин (до 80% от общего). Уровень общего билирубина повышается у животных больных гемолитической желтухой, усиленном гемолизе эритроцитов, и значительно в меньшей степени при гепатите и циррозе печени. Прямой билирубин находится в крови в незначительных количествах (от 0 до 5мкмоль/л) и повышается при болезнях печени и ее выводящих путей.
Глюкоза (сахар) — является основным источником энергии для организма. На ее долю приходится более 90% всех низкомолекулярных углеводов. Относительно постоянный уровень глюкозы в крови (40-60 мг% или 2,2-4,0 ммоль/л) поддерживается в организме животного гормонально. Гипогликемия у животных встречается при кетозе, вторичной остеодистрофии, послеродовом парезе, некоторых формах ожирения, токсических поражениях печени. Она часто бывает у животных в результате недостатка легкоусвояемых углеводов в кормах, большой потребности высокопродуктивных коров в глюкозе при высококонцентратном типе кормления, при преобладании в рационе кислых кормов. Гипогликемия у животных может быть как стойкой, так и непродолжительной. Непродолжительная гипогликемия бывает при скармливании животным больших количеств сахаристых кормов, а также при испуге животного, высокой температуре, стрессах. Стойкая гипергликемия встречается при сахарном диабете. Ветеринарные специалисты должны помнить, что концентрация глюкозы в сыворотке (плазме) крови при хранении быстро снижается, поэтому определение глюкозы необходимо проводить сразу же после взятия крови, а если нет такой возможности необходимо провести осаждение белков трихлоруксусной кислотой непосредственно на ферме.
источник
Лихоман Александр Владимирович, аспирант; ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет», г.Краснодар Temryukagro@yandex.ru
Комарова Нина Сергеевна,магистрант, ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет», г.Краснодар
Кощаев Андрей Георгиевич, доктор биологических наук, профессор; ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет», г. Краснодарkagbio@mail.ru
Усенко Валентина Владимировна, кандидат биологических наук, доцент; ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет», г. КраснодарValentinaDer@yandex.ru
Гипогликемия как основание для прогноза
критическойпотери живой массы коров
Аннотация.Статья посвящена обоснованию способа предотвращения анорексии и прогрессирующей потери живой массы коров в переходный период.Ключевые слова:коровы, гипогликемия, потеря живой массы, нервноартритический диатез.
В молочном животноводстве существует проблема, осложняющая ситуацию намировом уровне –прогрессирующее снижение продуктивного долголетия и срока хозяйственного использования коров [1].Животноводческие хозяйства сталкиваются с повышением показателя выбраковки коров дойного стада в связи с заболеваниями неинфекционной этиологии: ацидоз рубца, кетоз, жировые гепатозы печени, сахарный диабет II типа, атония, воспалительные заболевания суставов, маститы, эндометриты, сердечнососудистые заболевания. Результатом является выбраковка коров на уровне 30 % и выше.Установлено, что уровень гибели либо вынужденного убоя коров по причине критической потери живой массы в ранний послеотельный период приближается к 40% от общего показателя выбытия животных из стада.Это указывает на несомненную актуальность тщательного изучения причин потери высокопродуктивных животных в возрасте 12 лактации, а также выявление возможностей влияния на механизмы соответствующих патологических процессов в их организме. Основная причина, по мнению исследователей, заключается в нарушении питания животныхв переходный период–3 недели до отела и 36 недель после отела,
допускающем дисбаланс концентратов и объемистых кормов. Растет число свидетельств отрицательного влияния избытка концентратов, и в особенности крахмала в рационе, что провоцируетсинтез триглицеридов, а в дальнейшем всю цепь нарушений параметров здоровья [1].Жировые гепатозы, нарушения синтеза инсулина и проявление гипогликемии, снижение активности в цикле трикарбоновых кислоти синтеза АТФ —все это необходимо рассматривать в качестве проявленийотрицательного баланса энергии. При дальнейшем развитии ситуации проявляетсядепрессия иммунитета, нарушение минерального обмена, супрессиясинтеза стеринови медиаторов.Так, недостаток эйкозаноидов сопровождается соответствующиминарушениями, обусловленными невозможностью реализации их медиаторных свойств в отношении гидрофильных гормонов (контроль сокращениягладких мышцкровеносных сосудов, бронхов, матки);высвобождении продуктов внутриклеточного синтеза (гормонов, HCl, мукоидов);метаболизмакостной ткани, эффектов периферической нервной системы, иммунологической реактивности,передвижения и агрегации лейкоцитов и тромбоцитов, активацииболевых рецепторов.Содержаниеглюкозывкрови(гликемия)—одиниз самых важных параметров гомеостазавысших животных. У лактирующих коров глюкоза играет ключевую роль в обеспечении организма энергией и субстратом для синтеза молочного жира. Оптимальная концентрация глюкозы находится в пределах 2,23,9ммоля/л (4070мг/дл). Установлено, что у жвачных животных поступлениев кровь глюкозы в результате пищеварениявесьма мало, так как в рубце она ферментируется до летучих жирных кислот (уксусной, пропионовой, масляной). Большое количество глюкозыв (до 34кг) синтезируется у коров в печени из пропионовой кислоты, ряда аминокислот, глицерина. Известны случаи, когда коровы, получавшие рацион со сниженным количеством концентратов (т.е. при уменьшении ресурсов, являющихся источниками глюкозы –крахмала и сахара), концентрация глюкозы в крови находилась на уровне,отвечающем требованиям физиологической нормы. Повидимому, питание животных при меньшем количествеконцентратов, но увеличении долигрубых кормов (силоса, сенажа, сена) создавало более благоприятные условия синтеза предшественников неоглюкогенеза и самой глюкозы печенью [1].
В составесыворотки крови животных со сниженным аппетитом отчетливо проявляетсярезкое снижение концентрации глюкозы, общего белка, кальция, фосфораи каротина, начиная с предродового периода ко дню родов. Можно полагать, что такие изменения связаны,с одной стороны,с недостаточным поступлением питательных веществ с кормом изза плохого аппетита у коров в переходный период, и с другой –недостаточно активизированной системой организма по мобилизации питательных веществ из запасов собственного тела. Восстановление физиологически нормальной концентрации этих веществ после родов происходит только по истечении 3й недели (минимум 24 дня) [2; 3].Многие исследователи отождествляют кетотическую гипогликемию, характерную для послеотельных нарушений у коров, с синдромом циклической ацетонемической рвотыдетей, поскольку имеется ряд идентичных характеристик. Этот синдром (СЦАР)изучен еще недостаточно, однако доказано, что он является частным случаем нервноартритического диатеза, обусловлен наследственными нарушениями в системе энергетического обмена (и в первую очередь –утилизации глюкозы и неоглюкогенеза), Ванамнезе (при обоих названных патологиях) отмечено нарушение питания: полное или частичное голодание(в том числе изза потери аппетита и анорексии);избыток животных жиров, но недостаток углеводов в рационе, стрессы. Важное место в этиопатогенезе занимают гормональные иметаболические нарушения, приводящие к гипогликемии, гиперкетонемии икетонуpии.Снижение уровня глюкозы крови косвенно свидетельствует о печеночной дисфункции.Все указанные нарушения пищевого поведенияи обмена веществ характерны и для коров в ранний послеотельный период и могут служить доказательством их принадлежности к однойиз разновидностейнервноартритического диатеза [2].
В условиях неустойчивого углеводного обмена инарушений функций печени происходит неполное окисление жирных кислот, что приводит к кетозу. В тяжелых случаях развивается ацетонемическая кома, предшествуемаяметаболическим ацидозом и гиперкетонемией. В продромальный период возникает запах ацетона изо рта и ацетонурия. В дальнейшем развивается анорексия. У коров не возникает соледефицитный эксикоз изза отсутствия рвоты, как это происходит у человека, однако отсутствие аппетита и анорексию мы склонны считать следствием особого состояния –тошноты, вызванной прямым раздражением рвотного центра измененной по составу кровью. Недостающая энергия и питательные вещества мобилизуются из тканей организма; необходимость неоглюкогенеза для поддержания «сахарного зеркала» сопровождается избыточным уровнем расщепления жира с образованием промежуточных продуктов; отмечается гиперкетонемия. Результатом названных процессов является жировая дистрофия печени и прямое токсическое влияние на нервную ткань; пораженная печень не выполняет возложенные на нее функции; нарушения усугубляются вплоть до гибели животных [3; 4].На основании вышеизложенного наиболее логичным является предположение о необходимости строгого контроля уровня глюкозы в крови коров в период глубокой стельности –начиная с 3й недели до предполагаемого дня отела. Определение концентрации глюкозы следует проводить с максимальным промежутком времени в 3 дня, а установление показателя на нижней границе нормы (2,2 ммоля/л) уже считать основанием для принятия срочных мер.
Научнохозяйственный эксперимент в хозяйствах Красноармейского и Темрюкского районов Краснодарского края доказал, что существует возможность предотвращения развития цепи патологических событий в организме, связанных с мобилизацией резервных структур и их использования с энергетической целью. Ученые называют в числе возможных рычагов влияния на организм в условиях гипогликемии фармакологические воздействия, направленные на блокировку первого этапа мобилизации жира из депо. Наиболее доступны Вадреноблокаторы (действующее вещество –пропранолол), причем в случае с полигастричными животнымитаблетированная форма эффекта не оказывала, но инъекции сопровождались весьма заметнымположительнымдействием..При отборе животных на опыт руководствовались показателем живой массы на момент начала опыта 580 кг за 2 недели до отела. Животных с «сомнительным» показателем концентрации глюкозы в крови поместили в контрольную и опытную группы в равных соотношениях. Инъекции 0,25%ного раствора анаприлина (пропранолола) осуществляли из расчета 2 мл на 1 голову,внутримышечно, ежедневно, однократно –в течение 14 дней до дня отела.Результаты эксперимента отражены в таблице 1. Таблица 1 Результаты применения инъекций пропранолола (учхоз «Кубань» Кубанского ГАУ)ПоказателиГруппа1 (контрольная) –без инъекций 2 (опытная) –инъекции 1. Живая масса нетелей за две недели до отела, кг5605562. Количество «тяжелых» родов1253. Живая масса коров через 2 недели после отела, кг4454884. Живая масса коров через 4 недели после отела, кг3945225. Наличие ацетона в моче, гол.73
Средняя величина потери живой массы в контроле уже близка к критической; животные, обнаружившие более высокую потерю, как показывает практика, впоследствии будут отнесены к категории «зообрак» и отправлены на вынужденный убой. В опытной группе среднее значение потери живой массы лежит в пределах физиологической нормы в «критический» период. Особо отмечаем факт гибели животных, у которых в предотельный период была установлена гипогликемия.Последствия тяжело протекающих отелов выражаются в различных акушерскогинекологических заболеваниях, которые тоже являются причиной выбраковки животных как непосредственно сразу после отела, так и в течение некоторого времени после него. Следует отметить, что отелы в обеих группах проходили под контролем специалистов; родовспоможение потребовалось 26 первотелкам из контрольной группы и 18 первотелкам из опытной. В таблице 2 приведена информация по сравнительной оценке эффективности применения адреноблокаторав учхозе «Кубань» КубГАУ и ООО СХП им. П.П. Лукьяненко Красноармейского района Краснодарского края.Схема применения препарата была аналогичной схеме предыдущего эксперимента.Таблица 2Сравнительная оценка приема (по 2м хозяйствам)ПоказателиУчхоз «Кубань» КубГАУООО СХП им. П.П. ЛукьяненкоЕжегодная выбраковка новотельных коров, голов6274
%2325из них по причине критической потери живой массы, %5060Сохранность новотельных коров при использовании пропранолола, %8790Потеря живой массы новотельных коров, кг: в контроле99,2100
Анализ приведенных в таблице 2 показателей дает основание утверждать, что в учхозе «Кубань» ежегодная выбраковка новотельных коров на 4 % меньше, чем в ООО СХП им. П.П. Лукьяненко; выше показатель сохранности новотельных коров и ниже величина потери живой массы в послеотельный период. Эти результаты вполне согласуются с мнением исследователей: более подверженными кетозу считаются хорошо упитанные животные. Так, в ООО СХП им. П.П. Лукьяненко (более упитанные животные) установлены повышенные показатели выбраковки животных изза обменных послеотельных нарушений здоровья. Эта же закономерность была установлена при анализе результатов многолетних наблюдений.Из таблицы 2 видно, что эффективность препарата при оценке потери живой массы в новотельных коров учхозе «Кубань» оказалась выше, чем в ООО СХП им. Лукьяненко, хотя показатель сохранности опытных животных в этом хозяйстве на 3 % выше. Показатель сохранности в обоих хозяйствах увеличился в среднем на 10%.В пересчете все на поголовье нетелей по хозяйству (учхоз«Кубань») можно ожидать, что применение инъекций анаприлина поможет снизить ежегодную выбраковку новотельных коров на 10%.В результате исследований установлено, что применение адреноблокатора пропранололаимеет высокую эффективность: потери живой массы снижаются в среднем на 50%, критической потери живой массы удается предотвратить у 45% первотелок. Это означает, что из 100 нетелей, у которых высока вероятность чрезмерной потери живой массы в «критический период», удается оставить в основном стаде около 40 животных. За счет испытанного в ходе нашей работы приема увеличивается показатель продуктивного долголетия животных и снижается процент ежегодной выбраковки коров, что особенно актуально для первотелок. Считаем доказанным, что оптимальным временем начала использования пропранолола является момент стойкого снижения уровня глюкозы (гипогликемия) в крови коров в сухостойный период.Цепь нарушений в «критический период» начинается с потери аппетита и анорексии, но точной причины потери аппетита до сих пор не установлено. Если будут получены доказательства принадлежности описываемого заболевания коров к одной из разновидностей нервноартритического диатеза и результату экспрессии поврежденных генов, то, вероятно, попытки лечения животных в клинический период обречены на неудачу. Существует предположение, что указанное нарушение в генотипе имеет тесную связь с молочной продуктивностью коров. Если следовать цели повышения уровня реализации генетического потенциала молочной продуктивности коров специализированных молочных пород, то следует ожидать неизбежного уменьшения продолжительности срока их хозяйственного использования. Это,в свою очередь, приводит к заключению оцелесообразности
ограничениявеличины удоя коровы на уровне 60007000 кг молока ради сохранения здоровья и увеличения продуктивного долголетия.Выводы1. В среднем 30 % показателя выбраковки коров обусловлено обменными нарушениями в организме животных в переходный период и послеотельными осложнениями. 2. Послеотельная анорексия и потеря живой массы коров в переходный период имеет общие черты с проявлением нервноартритического диатеза –синдромом циклической ацетонемической рвоты.3. Начальным звеном в реализации программы прогрессирующей потери живой массы коров в переходный периодявляется снижение концентрации глюкозы в крови до уровня ниже 2,2 ммоль/лперед отелом.4. βАдреноблокатор пропранололв инъекционной форме при его использовании с момента установления гипогликемии у коров блокирует мобилизацию структурных жиров, препятствуя прогрессирующей потере живой массы, стимулирует родовую деятельность, ускоряет отделение последа и снижает количество «тяжелых» отелов. 5. Эффективность βадреноблокатора пропранололаболее выражена при инъекции животным, имеющим более низкую (в пределах нормы) живую массу при первом осеменении и перед отелом. 6. Применение пропранололаэкономически оправдано: потери живой массы снижаются в среднем на 50%, критической потери живой массы удается предотвратить у 45% первотелок, что увеличивает показатель продуктивного долголетия коров и снижает процент ежегодной выбраковки.
1. Для своевременного выявления нарушений в организме коров, имеющих наибольший вес в показателе ежегодной выбраковки, предлагаем проведение поголовной сезонной диспансеризации животных с обязательной оценкой биохимического состава крови.2. Для своевременного вмешательства в механизм развития ацетонемии и послеотельной потери живой массы предлагаем осуществление контроля концентрации глюкозы в кровивсех глубокостельных коров в период 3 недель до дня отела с периодичностью 3 дня.3. Для снижения величины потерь живой массы первотелок и полновозрастных коров и показателя их выбраковки предлагаем использовать инъекции 0,25%ного раствора анаприлина (пропранолола) из расчета 2 мл на 1 голову, внутримышечно, ежедневно, однократно –в течение 14 дней до дня отела.
Ссылки на источники1.Рядчиков В. Г. Почему гибнут высокопродуктивные коровы и как это остановить / В. Г. Рядчиков // Земля и жизнь. –2009. № 10. –8с. 2.Лихоман А. В., Усенко В. В. Использование инъекций адреноблокатора для снижения потерь живой массы новотельных коров / А. В. Лихоман, В. В. Усенко // Студенчество и наука: сб. науч. тр. /КубГАУ. 2011. –Вып. 7. С. 112113.3.Масалов В. Н. Эффективность применения адреноблокатора для оптимизации воспроизводительной функции коров: автореф. дис. дра вет. наук. / В. Н. Масалов // Боровск, 2007.36 с. 4.Эрнст Л. К. Репродукция животных / Л. К. Эрнст, А. Н. Варнавский. –М.: Биотехнология, 2002.–С. 3236.
источник
СОДЕРЖАНИЕ ГЛЮКОЗЫ В КРОВИ И СТЕПЕНЬ ЖИРОВОЙ
ИНФИЛЬТРАЦИИ ПЕЧЕНИ У НОВОТЕЛЬНЫХ КОРОВ ПРИ РАЗНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ ЦЕННОСТИ РАЦИОНА
Е.В. ДУШКИН, Ю.И. МИКУЛЕЦ
Изучали динамику концентрации глюкозы в крови и степень жировой инфильтрации печени для определения особенностей обмена глюкозы и липидов в связи с молочной продуктивностью у новотельных коров ярославской жирномолочной породы при разной питательности рационов.
Ключевые слова: глюкоза, кровь, печень, жирные кислоты, новотельные коровы, кормление, молочная продуктивность, глюконеогенез.
Key words: glucose, blood, liver, fatty acids, fresh cows, feeding, milk productiviry, gluconeogenesis.
Одна из основных функций печени — контроль снабжения организма глюкозой. У жвачных углеводы корма трансформируются в рубце в летучие жирные кислоты (ЛЖК), в связи с чем синтез глюкозы в печени играет первостепенную роль. Из пищеварительного тракта поступает около 10 % глюкозы, остальные 90 % обеспечивает глюконеогенез, в котором глюкоза образуется из пропионата и других источников (1, 2).
При дефиците глюкозы усиливается глюконеогенез, главным образом за счет липидов, что, в свою очередь, приводит к образованию значительного количества неэтерифицированных жирных кислот (НЭЖК). Печень извлекает из кровиНЭЖК, когда они поступают в избытке, и превращает их в триацилглицеролы. Если секреция триацилглицеролов печенью не возрастает пропорционально их синтезу, возникает инфильтрация печени липидами, которая наблюдается у всех коров в начале лактации (3).
Известно, что у коров в первые 2 мес лактации может возникнуть несоответствие между фактическим потреблением питательных веществ корма и их расходованием на молокообразование и другие функции организма, поскольку даже при соблюдении всех известных на сегодня требований к балансированию рационов животные испытывают недостаток в энергии, основным источником которой служит глюкоза, и протеине вследствие того, что потребление питательных веществ корма меньше, чем их затраты на продукцию молока.
В этой связи мы провели исследования по оптимизации питательности рациона коров в период раздоя на основании оценки содержания глюкозы в крови и липидов в печени животных.
Методика. В опытах использовали три группы коров-новотелок ярославской породы (по 8 гол. в каждой) в 1-й, 2-й и 3-й мес лактации. Наблюдения проводили в условиях совхоза «Правдино» (Некоузский р-н, Ярославская обл.), лабораторно-аналитическую часть исследований выполняли во Всероссийском НИИ физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных (ВНИИФБиП). Животные I группы (контроль) получали рацион согласно рекомендуемым нормам ВАСХНИЛ (Калашников и др., 1986); во II группе коров питательная и энергетическая ценность рационов была соответственно на 15 % выше, в III — на 15 % ниже, чем в контроле.
Животных содержали в одинаковых зоогигиенических условиях. У всех животных в начале и конце периода лактации брали кровь из яремной вены утром натощак и делали биопсию печени. В пробах крови определяли концентрацию глюкозы ферментативным (оксидазным) методом (по Keston, 1956), в образцах печени — содержание триацилглицеролов и общих липидов по Блюру в модификации Брагдона (1951) посредством экстракции в хлороформ-метанольной смеси (2:1) и окисления хромовой кислотой.
Статистическую обработку данных проводили по Н.А. Плохинскому (1970).
Результаты. У животных II группы содержание глюкозы в крови было достоверно выше, чем у таковых I (контроль) и III групп, что свидетельствует о достаточно высокой энергетической обеспеченности (табл. 1). Следовательно, принятая норма кормления для коров (I группа) и тем более его дефицит (III группа) в период интенсивной лактации не может обеспечить организм энергетическими субстратами, в частности глюкозой.
1. Содержание глюкозы в крови коров-новотелок ярославской породы по месяцам лактации в зависимости от питательности рациона
источник
В настоящее время интенсивные технологии в животноводстве занимают ведущее значение. Процесс эффективного молочного и мясного производства все стремительней отдаляет условия содержания животных от их естественной среды обитания. Сегодня уже смело можно сказать, что чем выше продуктивность животных, тем больше сбоев и срывов происходит из-за нарушения обмена веществ, в связи с особым значением кормления и содержания. Поэтому все без исключения специалисты животноводства должны участвовать в процессе не только производства продукции, но и создания комфортных условий пребывания животных на ферме.
Высокая продуктивность животных неразрывно связана с активизацией функционирования всех органов и систем организма. При этом уровень обмена веществ у некоторых животных настолько высок, что организм может работать на самоуничтожение. К сожалению, многие руководители хозяйств, специалисты-зооинженеры, ветеринарные врачи и даже ряд ученых этим пренебрегают. В наиболее распространенном понимании это выглядит так: «Животное имеет достаточно высокую продуктивность при имеющемся кормлении, качестве обслуживания и обработках– значит все нормально. Нужно еще поискать резервы экономии ресурсов». В результате таких настроений многие не могут понять, почему при погоне за удоем стремительно сокращается поголовье, почему коровы заканчивают третью лактацию на мясокомбинате с жировой дистрофией печени и т.д.
В большинстве случаев мы замечаем отклонения в здоровье, когда уже есть симптомы заболевания, а, значит, негативный фактор был, он оставил свой след в организме и, теперь, выдает ответную реакцию организма на его воздействие. Другими словами мы пропускаем, минимум два периода развития процесса – проникновение и распространение в организме. Разрабатывая наши рекомендации, надеемся, что вы, регулярно пользуясь биохимическими исследованиями крови, сможете на ранних стадиях неблагоприятного влияния своевременно отреагировать, классифицировать и принять меры к устранению воздействия.
Кровь является одной из главнейших связующих систем целостного организма. Она обеспечивает питание и дыхание всех органов и тканей, снабжает их необходимыми ферментами, гормонами, медиаторами и другими гуморальными веществами, без которых нормальное функционирование организма невозможно. У здоровых животных при нормальных физиологических условиях существует постоянство химико-морфологического состава и физико-химических свойств крови. Кроветворные органы чувствительно реагируют на различные физиологические и, в особенности на патологические, воздействия на организм изменением картины крови. Поэтому исследование крови имеет большое диагностическое значение.
Конечно, нужно заметить, что определенную ценность биохимические показатели имеют при внутренних незаразных болезнях, интоксикациях, но в большей степени отражают уровень кормления и обменные процессы. В связи с этим биохимические показатели не могут дать ответы на все вопросы, но при правильном понимании физиологических изменений становятся твердым основанием для принятия производственных решений.
ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБ КРОВИ
Для того чтобы провести биохимическое исследование необходимо правильно произвести отбор крови у животных.
Существует несколько вариантов взятия крови. Многие специалисты успешно их используют. Мы же остановимся на классическом (традиционном) способе.
У крупных животных кровь берут из яремной вены, расположенной в яремном желобе. Предварительно проводят антисептическую обработку – в месте вкола шерсть выстригают, поверхность кожи обрабатывают 70%-ным раствором спирта или 5% раствором йода.
Для взятия используют специальные инъекционные иглы заранее стерилизованные. Вкол проводят под углом 45 0 и во время набора крови иглу прижимают к стенке пробирки, чтобы избежать вспенивания.
Метод взятия крови у овец и коз такой же как и у коров.
У свиней кровь получают, отсекая кончик хвоста. У поросят оптимальным местом для взятия служит полая вена.
У птицы кровь берут из разреза гребня или сережек. У гусей и уток пункцию берут из мякоти ступней лапок.
Пробирки для отбора проб крови на исследования специалисты хозяйств могут получать в ветеринарной лаборатории или заранее готовить в условиях хозяйства, если такая возможность имеется.
Во время подготовки специальной посуды на одно животное запасают по 2 биологических пробирки, объемом не менее 20 мл, и по 2 центрифужных пробирки объемом 12 мл. В первую биологическую пробирку (20 мл) вносят 1%-ный раствор гепарина 2-3 капли или, если не определяется натрий в плазме крови, то для стабилизации используют лимоннокислый натрий. В результате полученную плазму можно исследовать на калий, натрий, каротин, витамины А и С.
Вторую пробирку оставляют без изменений, так как в ней будут получать сыворотку крови. В сыворотке крови определяют содержание общего белка, белковых фракций, мочевины, общих липидов, общего холестерина, общего кальция, йода неорганического, активность щелочной фосфатазы и др.
В одну из центрифужных пробирок вносят 0,5 мл вазелинового масла и каплю 1%-ного гепарина. После длительного центрифугирования 20-30 мин. уже в плазме определяют резервную щелочность. Во вторую центрифужную пробирку вносят 5 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. В дальнейшем из этой пробирки определяют глюкозу, неорганический фосфор и неорганический магний.
Для всех пробирок используются резиновые пробки, но в некоторых случаях допускаются пробки из ватных тампонов завернутых в марлевую повязку, при обязательном условии стерилизации и вертикальной транспортировки проб.
Таким образом, уже сама подготовка пробирок для взятия крови животных на исследование является трудоемкой и длительной. Поэтому в последнее время ее значительно упростили. Например, для биохимического исследования отбирают по 2⁄3 20 мл пробирки, а для гематологического и того меньше. В первую очередь это связано с разработкой в научно-исследовательских институтах специальных диагностикумов для определения биохимических компонентов с более мягкими требованиями пробоподготовки. Но и не последнее место занимает, конечно, сама точность и направление исследований. Если в каких то реакциях вам не нужны сотые и тысячные доли (не научные исследования) или вы уделяете большее внимание, каким то конкретным показателям, то, естественно, лучше упростить процедуру отбора.
БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ
Каротин является провитамином ретинола – витамина А. Содержится в растительных кормах, молозиве, рыбьем жире. Наибольшее значение имеет β-каротин. В тонком кишечнике и печени β-каротин превращается в витамин А. Основное депо каротина и витамина А – печень.
Витамин А способствует биосинтезу холестерина, ускоряет обмен фосфорных соединений, участвует в обмене веществ, повышает реактивность и резистентность, участвует в процессах иммуногенеза, повышении фагоцитарной активности лейкоцитов и выработке антител, стимулирует рост и развитие животных.
Количество каротина в сыворотке крови определяют спектрофотометрическим методом.
Принцип метода основан на щелочном гидролизе и экстракции витамина А и каротина из плазмы крови при помощи малолетучих растворителей и последующем спектрофотометрическом измерении поглощения света раствором при длине волны 328 нм для витамина А и 460 нм для каротина.
Материал для исследования – плазма крови.
Физиологические пределы: Содержание каротина в сыворотке крови повышается в летний период и снижается в зимне-стойловый период. Уровень каротина в сыворотке крови свидетельствует о величине поступления его в организм с кормами. Усвоение его и превращение в витамин А зависит от интенсивности обменных процессов в организме.
Количество каротина в сыворотке крови животных
источник